簡單的說，pcr儀就是利用dna聚合酶對特定基因做體外或試管內(nèi)in vitro的大量合成，基本上它是利用dna聚合酶進(jìn)行專一性的連鎖復(fù)制。目前常用的技術(shù)，可以將一段基因復(fù)制為原來的一百億至一千億倍。根據(jù)dna擴(kuò)增的目的和檢測的標(biāo)準(zhǔn)，可以將pcr儀分為普通pcr儀，梯度pcr儀，原位pcr儀，實時熒光定量pcr儀四類。
普通的pcr儀:
把一次pcr擴(kuò)增只能運(yùn)行一個特定退火溫度的pcr儀，叫傳統(tǒng)的pcr儀，也叫普通pcr儀。如果要做不同的退火溫度需要多次運(yùn)行。主要是做簡單的，對目的基因退火溫度的擴(kuò)增。該儀器主要應(yīng)用于科研研究，教學(xué)，醫(yī)學(xué)臨床，檢驗檢疫等機(jī)構(gòu)。
梯度pcr儀:
把一次性pcr擴(kuò)增可以設(shè)置一系列不同的退火溫度條件（溫度梯度），通常有12種溫度梯度，這樣的儀器就叫梯度pcr儀。因為被擴(kuò)增的不同dna片段，其zui適退火溫度是不同的，通過設(shè)置一系列的梯度退火溫度進(jìn)行擴(kuò)增，從而一次性pcr擴(kuò)增，就可以篩選出表達(dá)量高的zui適退火溫度，進(jìn)行有效的擴(kuò)增。主要用于研究未知dna退火溫度的擴(kuò)增，這樣節(jié)約成本的同時也節(jié)約了時間。主要用于科研，教學(xué)機(jī)構(gòu)。梯度pcr儀，在不設(shè)置梯度的情況下也可以做普通pcr擴(kuò)增。具有雙槽梯度的不多，領(lǐng)成具備此功能。
原位pcr儀:
用于從細(xì)胞內(nèi)靶dna的定位分析的細(xì)胞內(nèi)基因擴(kuò)增儀，如病源基因在細(xì)胞的位置或目的基因在細(xì)胞內(nèi)的作用位置等。是保持細(xì)胞或組織的完整性，使pcr反應(yīng)體系滲透到組織和細(xì)胞中，在細(xì)胞的靶dna所在的位置上進(jìn)行基因擴(kuò)增，不但可以檢測到靶dna，又能標(biāo)出靶序列在細(xì)胞內(nèi)的位置，于分子和細(xì)胞水平上研究疾病的發(fā)病機(jī)理和臨床過程及病理的轉(zhuǎn)變有重大的實用價值。
實時熒光定量pcr儀:
在普通pcr儀的基礎(chǔ)上增加一個熒光信號采集系統(tǒng)和計算機(jī)分析處理系統(tǒng)，就成了熒光定量pcr儀。其pcr擴(kuò)增原理和普通pcr儀擴(kuò)增原理相同，只是pcr擴(kuò)增時加入的引物是利用同位素、熒光素等進(jìn)行標(biāo)記，使用引物和熒光探針同時與模板特異性結(jié)合擴(kuò)增。擴(kuò)增的結(jié)果通過熒光信號采集系統(tǒng)實時采集信號連接輸送到計算機(jī)分析處理系統(tǒng)得出量化的實時結(jié)果輸出。把這pcr儀叫做實時熒光定量pcr儀(qpcr儀)。熒光定量pcr儀有單通道，雙通道，和多通道。當(dāng)只用一種熒光探針標(biāo)記的時候，選用單通道，有多熒光標(biāo)記的時候用多通道。單通道也可以檢測多熒光的標(biāo)記的目的基因表達(dá)產(chǎn)物，因為一次只能檢測一種目的基因的擴(kuò)增量，需多次擴(kuò)增才能檢測完不同的目的基因片段的量。該儀器主要用于醫(yī)學(xué)臨床檢測，生物醫(yī)藥研發(fā)，食品行業(yè)，科研院校等機(jī)構(gòu)。
關(guān)鍵詞：擴(kuò)增儀