猴γ干擾素(ifn-γ)elisa試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(elisa)。將樣品、標(biāo)準(zhǔn)品和hrp標(biāo)記的檢測抗體依次加入被捕獲抗體包被的包被微孔中,孵育并*洗滌。與底物tmb顯色,tmb在過氧化物酶的催化下變成藍(lán)色,在酸的作用下變成最終的黃色。顏色深度與樣本中的顏色深度呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長處測定吸光度(od值)并計(jì)算樣品濃度。
猴γ干擾素(ifn-γ)elisa試劑盒樣品處理和要求:
1、血清:全血標(biāo)本室溫放置2小時(shí)或4℃過夜,1000g離心20分鐘,取上清液檢測,或標(biāo)本保存于-20℃或-80℃℃,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.血漿:edta或肝素可用作抗凝劑。樣品采集后30分鐘內(nèi),2-8℃1000g離心20分鐘,或保存于-20℃或-80℃,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3、細(xì)胞培養(yǎng)上清液或其他生物樣品:1000g離心20分鐘,取上清液檢測,或保存在-20℃或-80℃,但避免反復(fù)凍融。
注意:樣品溶血會(huì)影響后期檢測結(jié)果,因此溶血樣品不應(yīng)進(jìn)行檢測。
猴γ干擾素(ifn-γ)elisa試劑盒使用相關(guān)問題解析:
1、試劑選擇:試劑在檢測前應(yīng)提前半小時(shí)在室溫下解凍。
2、加樣過程中可能出現(xiàn)的問題:當(dāng)使用血清或血漿作為檢測試劑時(shí),血清和血漿難以分離。這時(shí)候的解決辦法是在室溫下放置1~2小時(shí),然后離心。
3、洗盤容易出錯(cuò):因?yàn)橄窗迨侨斯は吹?,所以判斷什么時(shí)候洗干凈了也是人為判斷的,這個(gè)時(shí)候帶有主觀色彩,所以多清洗幾次,還有就是在洗的時(shí)候孔與孔之間的液體容易交叉流動(dòng)。
4、顯色問題:使用過期的顯影劑或顯影劑使用后放置時(shí)間過長,可能導(dǎo)致顯影劑不顯色。因此,在進(jìn)行顯色反應(yīng)時(shí),首先要檢查顯影液本身的狀況。
5、終止反應(yīng):在加終止劑的時(shí)候由于傾倒速度快,差生氣泡,造成假陽性結(jié)果。所以在倒終止劑的時(shí)候要緩慢倒。
6、讀板:讀板的時(shí)候首先應(yīng)該保證板的清潔干凈。
關(guān)鍵詞:酶標(biāo)儀