dna分子是一種自身不會(huì)發(fā)出熒光的大分子，需要相應(yīng)的核酸分子染料結(jié)合到dna分子的大溝處，通過激發(fā)光激發(fā)dna –核酸染料復(fù)合物，復(fù)合物會(huì)發(fā)出一束強(qiáng)熒光，通過相應(yīng)的濾光片過濾得到單波長(zhǎng)的發(fā)射光，通過照相機(jī)或者肉眼捕獲就能夠檢測(cè)到相應(yīng)的dna分子。那么瓊脂糖核酸電泳要選擇紫外還是藍(lán)光呢？讓我們一起來看看吧！
從核酸電泳發(fā)展至今，絕大多數(shù)的分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室選擇溴化乙錠（etbr，也簡(jiǎn)稱eb）作為核酸分子染料，由于eb的光譜特性，又不得不選擇紫外光作為激發(fā)光。eb分子因其分子量較小，容易透過細(xì)胞膜，因此是一種致癌性ji強(qiáng)的有機(jī)小分子。而紫外光（uv）照射也會(huì)誘發(fā)基因突變，不僅會(huì)引發(fā)實(shí)驗(yàn)樣品的基因突變，也會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)人員造成一定的傷害。
為了解決eb分子的致癌問題，科研工作者通過有機(jī)合成技術(shù)將兩個(gè)eb分子通過有機(jī)分子鏈連在了一起，解決了eb分子因分子量比較小容易通過細(xì)胞膜的問題，連在一起的分子被稱為gelred。這雖然解決了染料相對(duì)安全的問題，可激發(fā)光依然是uv，不能夠從本質(zhì)上解決對(duì)實(shí)驗(yàn)樣品和實(shí)驗(yàn)操作者自身的安全問題。
事實(shí)上，除了eb和gelred這兩種以u(píng)v為激發(fā)光的核酸分子染料，還存在另一類核酸分子染料，如：gelgreen、sybr green、sybr gold、led green、sybr safe、goldview等以480nm藍(lán)光為激發(fā)光的核酸染料，這類染料分子量相對(duì)較大，細(xì)胞膜通透性較差，因此對(duì)實(shí)驗(yàn)人員帶來的危害較小，相對(duì)eb分子是一種較安全的核酸分子染料。
由于波長(zhǎng)470nm藍(lán)光屬于可見光，不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)樣品造成破壞，也不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)人員造成危害，因此470nm的藍(lán)光搭配安全核酸分子染料能夠zui大程度降低核酸瓊脂糖凝膠電泳帶來的潛在危險(xiǎn)。
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