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        蛋白酶K的作用及保存方法

        發(fā)布時(shí)間:2024-08-12
        作用:蛋白酶k在原位雜交技術(shù)中通常用于雜交前的處理,它具有消化包圍靶dna蛋白質(zhì)的作用,以增強(qiáng)探針與靶核酸結(jié)合的機(jī)會(huì),提高雜交信號(hào)。但蛋白酶k濃度過(guò)高、消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或孵育溫度過(guò)高時(shí),都會(huì)對(duì)細(xì)胞結(jié)構(gòu)有一定的破壞,導(dǎo)致組織切片脫落,細(xì)胞核的消失,從而影響雜交結(jié)果。edta緩沖液可以代替蛋白酶k的作用,解決上述出現(xiàn)的問(wèn)題,并能達(dá)到理想的染色效果。保存方法:保存在-20℃的冰箱里,避免反復(fù)凍融,有效保證12個(gè)月。孵育溫度為55-65℃,理想孵育溫度為58℃,孵育時(shí)間為15分鐘至48小時(shí),理想孵育時(shí)間為2小時(shí)
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