摘要 采用蠶豆根尖細(xì)胞微核檢測(cè)技術(shù)，分析測(cè)定不同茶類抗香煙煙霧水溶物誘變的效果.結(jié)果表明，各茶類茶葉都具有明顯降低香煙煙霧水溶物誘發(fā)細(xì)胞微核率的作用，抗誘變效果為綠茶、烏龍茶明顯優(yōu)于白茶、紅茶，而綠茶與烏龍茶及白茶與紅茶之間差異不大；各茶類1∶50茶水比抗誘變能力強(qiáng)于1∶100茶水比；抗誘變效果與茶葉中兒茶素含量高低呈正相關(guān).由此提示飲茶可能是吸煙與被動(dòng)吸煙者抗煙毒的有效途徑之一.
關(guān)鍵詞 茶類；香煙煙霧水溶物；微核率；兒茶素
中圖分類號(hào) s571.1
effects of different tea on decreasing cellular micronuclei frequency induced by cigarette
sun yun
(department of horticulture, fujian agricultural university, fuzhou 350002)
guo chunfang
(department of biology, fujian educational college, fuzhou 350001)
abstract different tea was added to water-soluble substance containing cigarette smoke and the effects were analysed by testing cellular micronuclei of root-tip cells of vicia faba．the results showed that the cellular micronuclei frequency decreased significantly．green tea and oolong tea were more effective than white tea and black tea, but there was less difference between green tea and oolong tea, so as white tea and black tea．a(chǎn)t the same time, the tea-liquid/water ratio of 1/50 was also more effective than that of 1/100．the effects were positively correlated with catechins．it could be deduced that drinking tea could control the harm from cigarette smoke.
key words tea; water-soluble substance contained in cigarette smoke; micronuclei frequency; catechins
微核(micronucleus)是真核類細(xì)胞中的一種異常結(jié)構(gòu),它通常是由各種理化因子對(duì)分裂細(xì)胞作用而產(chǎn)生的.微核高峰出現(xiàn)在畸變高峰之后，染色體的畸變是導(dǎo)致微核形成的重要因素.由于微核形成和染色體畸變的一致性，微核檢測(cè)法廣泛應(yīng)用于評(píng)定理化因子誘變活力及環(huán)境監(jiān)測(cè)等研究領(lǐng)域.特別是蠶豆根尖細(xì)胞微核檢測(cè)技術(shù)，試驗(yàn)周期短，方法簡(jiǎn)便、經(jīng)濟(jì)，應(yīng)用領(lǐng)域更加廣泛.
微核檢測(cè)除用于化學(xué)誘變劑誘變活力的檢測(cè)外，還用于評(píng)價(jià)抗誘變物的抗誘變效果.洪振豐等(1990）研究烏龍茶對(duì)naf和as2o3誘發(fā)細(xì)胞微核的影響，結(jié)果表明5％烏龍茶具抗f、as誘發(fā)的細(xì)胞遺傳損傷的作用.嵇慶等(1995a,1995b）研究ve、vc、亞硒酸鈉、煙酰胺及綠茶浸出物對(duì)香煙煙霧水溶物抗誘變的效果，提出這些物質(zhì)可能具有減輕吸煙引起的遺傳毒性損傷作用.茶葉做為保健飲料為世人所矚目，茶葉提取液具消除煙堿作用，可降解人體內(nèi)尼古丁和煙焦油（陳天霓等,1993;王云,1990;周慶惠,1990）.本文運(yùn)用蠶豆根尖細(xì)胞微核檢測(cè)技術(shù)，研究比較綠茶、烏龍茶、白茶和紅茶抗香煙煙霧水溶物誘變作用的效果，及其與茶葉中主要物質(zhì)含量變化的關(guān)系.
1 材料與方法
1.1 材料
1997年春季教學(xué)茶樣（福建農(nóng)業(yè)大學(xué)茶學(xué)教研室）：綠茶為烘青，烏龍茶為黃旦，白茶為白牡丹，紅茶為工夫紅茶.富健牌過(guò)濾嘴香煙（福建龍巖卷煙廠），煙絲重(737.0±6.6) mg.支-1.蠶豆(vicia faba)為白皮蠶豆（福州市售）.
1.2 方法
1.2.1 香煙煙霧水溶物的制備 參照嵇慶等(1995b)的方法.取帶三通的密閉三角瓶1只，將香煙過(guò)濾嘴插入一端并點(diǎn)燃，另一端接注射器，緩慢抽吸.待煙霧抽滿注射器內(nèi)后，用左手捏住過(guò)濾嘴端的膠管，右手用力推動(dòng)注射器，使煙霧緩慢通過(guò)三角瓶中的蒸餾水，輕搖三角瓶反復(fù)抽吸，直至香煙燃燒完畢.
為取得含量一致的香煙煙霧水溶物，試驗(yàn)采用集中制備方法，使250 ml蒸餾水中含2支香煙煙霧水溶物.
1.2.2 蠶豆根尖制備 洗凈蠶豆種子，置28 ℃培養(yǎng)箱內(nèi)用蒸餾水浸種催芽，24 h后置于鋪有濕紗布的托盤(pán)內(nèi)，在28 ℃下培養(yǎng)3 d，待根長(zhǎng)至2～3 cm時(shí)備用.
1.2.3 染毒、修復(fù) 選發(fā)育良好、根長(zhǎng)一致的蠶豆幼苗插入有孔的培養(yǎng)板中，置于各試驗(yàn)處理溶液（將煙霧水溶液加熱至沸，添加各茶類，水浴15 min后冷卻用于試驗(yàn)）中，使根尖完全浸入，28 ℃下培養(yǎng)6 h后用蒸餾水清洗根尖2次，再換入新鮮蒸餾水修復(fù)培養(yǎng)22 h.
1.2.4 固定保存 切取處理好的根尖，用新配的卡諾氏固定液（無(wú)水乙醇∶冰乙酸＝3∶1）固定24 h后轉(zhuǎn)入體積分?jǐn)?shù)為0.70酒精，置于4 ℃冰箱保存?zhèn)錂z.
1.2.5 染色與觀察統(tǒng)計(jì) 取固定好的根尖，用1 mol.l-1 hcl在60 ℃下水解15 min，后經(jīng)schiff試劑染色，制片鏡檢，每組至少觀察5個(gè)根尖，每個(gè)根尖至少計(jì)數(shù)1000個(gè)細(xì)胞，計(jì)算蠶豆根尖細(xì)胞微核千分率，并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析.
1.2.6 內(nèi)含物測(cè)定 茶多酚含量由酒石酸亞鐵分光光度法測(cè)定，兒茶素含量由香莢蘭素比色法測(cè)定.
2 結(jié)果與分析
2.1 不同茶類對(duì)香煙煙霧水溶物誘變作用的影響
蠶豆根尖細(xì)胞微核率檢測(cè)的結(jié)