超碰在线91,国产第1页,国产精品99,最近中文字幕av

<video id="z2k50"><ins id="z2k50"></ins></video><small id="z2k50"><pre id="z2k50"><samp id="z2k50"></samp></pre></small>

    1. <video id="z2k50"><ins id="z2k50"></ins></video>

        小鼠睪酮(T)ELISA試劑盒操作說明

        發(fā)布時間:2024-06-07
        小鼠睪酮(t)elisa試劑盒操作說明
        小鼠睪酮(t)elisa試劑盒實驗原理
        小鼠睪酮(t)elisa試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(elisa)。往預先包被小鼠睪酮(t)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、hrp標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并徹di洗滌。用底物tmb顯色,tmb在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠睪酮(t)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(od 值),計算樣品濃度。
        樣本處理及要求
        1. 血清:將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過夜,然后1000×g離心20 分鐘,取上清即可,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
        2. 血漿:用edta或肝素作為抗凝劑采集標本,并將標本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
        3. 組織勻漿:用預冷的pbs (0.01m, ph=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的pbs(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應9ml的pbs,具體體積可根據(jù)實驗需要適當調(diào)整,并做好記錄。推薦在pbs中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復凍融。最后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。
        4. 細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本:請1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
        注:標本溶血會影響最后檢測結果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。
        需要而未提供的試劑盒器材
        1.酶標儀(450nm)
        2.高精度加樣器及槍頭:0.5-10ul、2-20ul、20-200ul、200-1000ul
        3.37℃恒溫箱
        4.蒸餾水或去離子水
        名稱
        96孔配置
        48孔配置
        備注
        微孔酶標板
        8孔×12條
        8孔×6條

        標準品
        0.3ml*6管
        0.3ml*6管

        樣本稀釋液
        6ml
        3ml

        檢測抗體-hrp
        10ml
        5ml

        20×洗滌緩沖液
        25ml
        15ml
        按說明書進行稀釋
        底物a
        6ml
        3ml

        底物b
        6ml
        3ml

        終止液
        6ml
        3ml

        封板膜
        2張
        2張

        說明書
        1份
        1份

        自封袋
        1個
        1個

        備注:
        1、標準品濃度依次為:詳見說明書;
        2、經(jīng)過大量正常標本檢驗,標本的正常濃度值均在試劑盒提供的檢測范圍內(nèi),實驗過程中直接取50μl樣本上樣即可。當有部分樣本值超過最大標準品濃度時,可用樣本稀釋液將標本進行適當稀釋后再進行實驗。
        注意事項
        1、嚴格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以保證準確結果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。
        2、洗板不正確可以導致不準確的結果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。
        3、消除板底殘留的液體和手指印,否則影響od值。
        4、底物顯色液應呈無色或很淺的顏色,已經(jīng)變藍的底物液不能使用。
        5、避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結果。
        6、在儲存和溫育時避免強光直接照射。
        7、平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
        8、任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應試劑的生物活性。
        9、不能使用過期產(chǎn)品。
        10、如果可能傳播疾病,所有的樣品都應管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。
        試劑準備
        試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡后方可使用。
        20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。
        操作步驟
        1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
        2.設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μl;
        3.樣本孔中加入待測樣本50μl;空白孔不加。
        4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(hrp)標記的檢測抗體100μl,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
        5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μl),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
        6.每孔加入底物a、b各50μl,37℃避光孵育15min。
        7.每孔加入終止液50μl,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的od值。
        實驗結果計算
        以所測標準品的od值為橫坐標,標準品的濃度值為縱坐標,在坐標紙上或用相關軟件繪制標準曲線,并得到直線回歸方程,將樣品的od值代入方程,計算出樣品的濃度。
        試劑盒性能
        1、檢測范圍:詳見產(chǎn)品說明書。
        2、靈敏度:最di檢測濃度小于0.1u/l。
        3、特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應。
        4、重復性:板內(nèi)變異系數(shù)小于10%,板間變異系數(shù)小于15%。
        上一個:干貨:亞馬遜印度站有沒有FBA?
        下一個:屠宰設備分類

        智能家居是物聯(lián)網(wǎng)換皮還是互聯(lián)網(wǎng)逆襲?
        固態(tài)硬盤壞塊怎么處理,固態(tài)硬盤出現(xiàn)壞塊了怎么辦
        智能密集柜的溫濕度管理及應用
        厚聲1206W4F2401T5E今日行情、最新報價
        cmedia(驊訊)品牌介紹_cmedia(驊訊)產(chǎn)品采購/價格查詢
        win8系統(tǒng)里面創(chuàng)建硬盤分區(qū)的辦法在哪(win8怎么硬盤分區(qū))
        長沙到銅仁物流專線 長沙到銅仁物流
        臥式快速影像測量機
        石灰石破碎機的選擇技巧
        云南能發(fā)快遞嗎(云南現(xiàn)在可以發(fā)快遞了嗎)