人正常組織細胞初代或傳代培養(yǎng)時,都有一長短不同的潛伏期。傳代細胞系、胚胎組織或幼體組織潛伏期短,一般在第二天即可見細胞生長,一周內(nèi)便可連接成片。成體組織的潛伏期長,老齡組織和癌組織更長,有時可達一周左右。
初代組織塊培養(yǎng)法細胞生長,z先從組織“長”出的為游走細胞,它們多單獨活動,形態(tài)不規(guī)則,用縮時逐格顯微攝電影法可顯示出極活躍的變形、游走和吞噬活動。在游走細胞之后,接著長出的是成纖維細胞或上皮細胞。只有當(dāng)出現(xiàn)細胞分裂、細胞數(shù)量逐漸增多、形成較大生長暈或連接成片時,細胞才真正進入增殖狀態(tài)。成纖維細胞是z易生長細胞,生長速度較快,低倍鏡下觀察時,前哨部位細胞似火焰狀或放射形狀向外擴展;如接種為游走細胞、膠質(zhì)細胞等細胞,在密度不大時,可連接成網(wǎng)狀,只有人正常組織細胞密度增大時才連接成片。
上皮細胞排列緊密,相互接壤成膜狀;上皮膜邊緣整齊,細胞很少單獨活動,生長時整個上皮膜發(fā)生移動。上皮細胞尤其是外胚層來源的細胞如表皮細胞等,生長過程中常產(chǎn)生溶解酶,能使細胞間質(zhì)發(fā)生液化,導(dǎo)致細胞相互分離,嚴重時可導(dǎo)致細胞脫落,其確切機制尚不明了.可能與產(chǎn)生透明質(zhì)酸酶有關(guān)。
細胞接種后,經(jīng)過懸浮期、潛伏期和指數(shù)增生期等后,z終將長滿瓶壁,如不及時做再培養(yǎng),由于營養(yǎng)物質(zhì)消耗和代謝產(chǎn)物積累,細胞即進入停滯期。此時細胞輪廓增強,細胞內(nèi)常出現(xiàn)前述有膨脹線粒體形成的堆積物,細胞變得粗糙,嚴重時細胞從瓶壁脫落,只有及時做傳代,才能使人正常組織細胞繼續(xù)生長。