使用方法:
1.準備適當稀釋比例的細胞懸液。
2.取出干凈的細胞計數板,從計數室兩側的加樣口緩慢加入6-10ul細胞懸液。注意不要有氣泡可同時計數4個樣品。
3.將計數板置于顯微鏡上,找到計數視野。靜置2-3min,待細胞沉降到計數板上,不再隨液體漂移。
4.采用合適的方法進行計數并計算細胞數目。
計數方法:
1)針對常規(guī)培養(yǎng)動物細胞
a)選取計數室四角4個大方格(每個大方格由16個中方格組成),即圖示w1,w2,w3,
w4,進行計數。
b)建議調整細肥密度為每個大方格細胞個數為100左右。
c)鏡下偶見有兩個以上細胞組成的細胞團,應按單個細胞計算,若細胞團10%以上,說明分散不好,需重新制備細胞懸液。計數一般遵循記上不計下,計左不計右原則。
d)細胞數目計算方法:
每個大方格面積為1mmx1mm,蓋玻片與計數室間高度為0.1mm,即每個大方格體積為
1mmx1mmx0.1mm=0.1mm3=0.1ul =10ml-4。
2)針對其他小型細胞(血細胞、細菌、酵母等)。
a)選取計數室中央計數區(qū)(含25個中方格每個中方格含16個小方格,共400個小方格)進行計數。分別計數5個中方格(如圖示1,2,3,4,5,或四角和中央一個中方格。
b )建議計數時每2個中方格細胞個數相差不超過20。
c)鏡下偶見有兩個以上細胞組成的細胞團,應按單個細胞計算,若細胞團10%以上,說明
分散不好,需重新制備細胞懸液。計數一般遵循記上不計下,計左不計右原則。
d)細胞數目計算方法:
每個中方格面積為0.2mmx0.2mm,蓋玻片與計數室間高度為0.1mm,即每個中方格體積
為0.2mmx0.2mmx0.1mm=0.004mm3=0.004ul=4x10-6ml。