凱氏定氮儀是蛋白質(zhì)含量檢測(cè)的常用儀器，廣泛用于檢測(cè)食品、糧食、油料、飼料等物品的粗蛋白含量。凱氏定氮儀使用頻率較高，因此本文就簡單介紹一下它的原理與使用方法。
原理：凱氏定氮法
在有催化劑的條件下，用濃硫酸消化樣品，將有機(jī)氮都轉(zhuǎn)變成無機(jī)銨鹽，然后堿化蒸餾使氨游離，隨水蒸氣餾出并為硼酸吸收，再以硫酸或鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定，根據(jù)酸的消耗量計(jì)算出樣品中的含氮量。
使用方法：
1.消化
將樣品與濃硫酸、硫酸銅、硫酸鉀小心混合加入燒瓶中，確保樣品的*浸潤。將燒瓶置于預(yù)熱到420℃的消化單元，消化至消化液呈透明澄清的藍(lán)綠色后，繼續(xù)加熱0.5~1 h，使樣品中的有機(jī)氮*轉(zhuǎn)化為無機(jī)氮-硫酸銨。
2.蒸餾
將消化液取下放冷，小心加入50 ml水。量取50 ml硼酸到接受瓶中，加入混合指示劑。連接好蒸餾裝置，向消解燒瓶中加人5 ml過量的氫氧化鈉溶液*中和所使用的硫酸，開始蒸餾。使消化液中的銨根轉(zhuǎn)化為氨后餾出，為過量的硼酸吸收。
4.滴定和計(jì)算
用硫酸或鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定吸收液至終點(diǎn)，計(jì)算氮含量及蛋白質(zhì)含量。然后根據(jù)試樣的不同種類，將氮含量乘以相應(yīng)的氮換算成蛋白質(zhì)的系數(shù)，即可得到蛋白質(zhì)含量。