本公司生產(chǎn)的產(chǎn)品符合sf/z jd血液中乙醇的測定頂空氣相色譜法標準規(guī)定要求
前 言
本技術(shù)規(guī)范按照gb/t 1.1-2009給出的規(guī)則起草。
本技術(shù)規(guī)范的附錄a和附錄b為資料性附錄。
本技術(shù)規(guī)范由司法鑒定科學技術(shù)研究所提出。
本技術(shù)規(guī)范由司法鑒定管理局歸口。
本技術(shù)規(guī)范起草單位：司法鑒定科學技術(shù)研究所。
本技術(shù)規(guī)范主要起草人：卓先義、劉偉、向平、沈保華、卜俊、馬棟、嚴慧。
本技術(shù)規(guī)范所代替規(guī)范的歷次版本發(fā)布情況為：sf/z jd0107001——2010。
00007血液中乙醇的測定
00008頂空氣相色譜法
000081 范圍
本技術(shù)規(guī)范規(guī)定了血液中乙醇的頂空氣相色譜測定方法。
本技術(shù)規(guī)范適用于血液中乙醇的定性及定量分析。
本技術(shù)規(guī)范的方法檢出限為0.01mg/ml；定量下限為0.05mg/ml。
000082 規(guī)范性引用文件
下列文件對于本技術(shù)規(guī)范的應(yīng)用是的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本技術(shù)規(guī)范。凡是不注日期的引用文件，其版本（包括所有的修改單）適用于本技術(shù)規(guī)范。
gb/t 6682 分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法（gb/t 6682-2008，iso 3696：1987，mod）
ga/t 122毒物分析名詞術(shù)語
000083 原理
本法利用乙醇的易揮發(fā)性，以叔丁醇為內(nèi)標，用頂空氣相色譜火焰離子化檢測器進行檢測，經(jīng)與平行操作的乙醇對照品比較，以保留時間進行定性分析；以峰面積為依據(jù)，用內(nèi)標法定量。
000084 試劑和材料
除另有說明外，水為gb/t 6682規(guī)定的二級水。
000084.1 乙醇
色譜純。
000084.2 乙醇標準溶液
精密稱取適量乙醇，用水配成10.0mg/ml乙醇標準儲備溶液。儲備液在冰箱中冷藏密閉保存，有效期為6個月。試驗中所用其它濃度的標準溶液均從上述儲備液稀釋而得，在冰箱中冷藏密閉保存，有效期為3個月。
000084.3 叔丁醇
色譜純。
000084.4 叔丁醇溶液
精密稱取適量叔丁醇，用水配成5.0mg/ml叔丁醇儲備液。儲備液在冰箱中冷藏密閉保存，有效期為12個月。將儲備液用水稀釋，得40.0μg/ml叔丁醇內(nèi)標工作液，在冰箱中冷藏密閉保存，有效期為6個月。
000085 儀器
000085.1 氣相色譜儀
配火焰離子化檢測器（fid）。
000085.2 頂空進樣器
配1ml定量進樣環(huán)。
000085.3 樣品瓶
10ml，頂空自動進樣器用。
000085.4 硅橡膠墊
000085.5 鋁帽
000085.6 密封鉗
000085.7 精密移液器
000085.8 自動稀釋儀
000086 測定步驟
000086.1 樣品處理
用精密移液器或自動稀釋儀取待測血液0.10 ml及0.50 ml 40.0μg/ml 叔丁醇內(nèi)標工作液，加入樣品瓶內(nèi)，蓋上硅橡膠墊，用密封鉗加封鋁帽，混勻。
000086.2 測定
000086.2.1 頂空氣相色譜測定參考條件
a） 色譜柱（1）：db-alc1（30m´0.32mm´1.8mm）石英毛細管柱或相當者；
柱溫：恒溫40°c；
色譜柱（2）：db-alc2（30m´0.32mm´1.2mm）石英毛細管柱或相當者；
柱溫：恒溫40°c；
b）載氣：氮氣，純度≥99.999%，流速8ml/min；
c）進樣口溫度：150°c；
d）檢測器溫度：250°c；
e）加熱箱溫度：65°c；
f）定量環(huán)溫度：105°c；
g）傳輸線溫度：110°c；
h）氣相循環(huán)時間：3.5min；
i）樣品瓶加熱平衡時間：10.0min；
j）樣品瓶加壓時間：0.10min；
k）定量環(huán)充滿時間：0.10min；
l）定量環(huán)平衡時間：0.05min；
m）進樣時間：1.00min。
000086.2.2 定性測定
樣品溶液按照頂空氣相色譜測定條件測定，以叔丁醇為內(nèi)標，記錄色譜峰的保留時間。將待測樣品色譜峰的保留時間與乙醇標準對照品的保留時間比較，相對誤差在±2%內(nèi)，空白對照樣品內(nèi)標物色譜峰正常而無乙醇的色譜峰，一般可以認為待測樣品中含有乙醇；必要時，選擇不同的色譜條件或用氣相色譜-質(zhì)譜法確證。如果內(nèi)標物色譜峰正常，而無乙醇的色譜峰時，可認為檢驗結(jié)果為陰性。乙醇對照品和內(nèi)標氣相色譜圖，參見附錄a。
000086.2.3 定量測定
本方法采用內(nèi)標法－校準曲線法或內(nèi)標法－單點校正法定量測定。
6.2.3.1內(nèi)標法－校準曲線法
采用內(nèi)標-校準曲線法測定（見附錄b）。將乙醇對照品溶液進樣，以乙醇和內(nèi)標峰面積比為縱坐標，乙醇對照品工作溶液濃度為橫坐標繪制標準曲線，用標準曲線對待測樣品進行定量，所測樣品中乙醇的濃度值應(yīng)在線性范圍內(nèi)。
6.2.3.2內(nèi)標法－單點校正法
待測血液樣品乙醇濃度在標準溶液濃度的±30%內(nèi)可用單點法定量。
000086.3 平行試驗
按以上步驟對同一待測樣品進行平行試驗。
單柱單檢測器兩份樣品測定結(jié)果按兩份樣品的平均值計算，雙樣相對相差不得超過10％（有凝的血樣不超過15％）。雙樣相對相差按式（1）計算：
| c1- c2|
雙樣相對相差（%）= ¾¾¾¾¾´100………………………………（1）
`c
式中：
c1、c2¾¾兩份樣品平行定量測定的結(jié)果；
`c ¾¾兩份樣品平行定量測定結(jié)果的平均值(c1+c2)/2。
雙柱雙檢測器兩份樣品測定結(jié)果的相對標準偏差rsd（%）若不超過5％時（有凝的血樣不超過10%），結(jié)果按兩份樣品結(jié)果的平均值計算。
000087 結(jié)果計算
血液中乙醇濃度測定采用內(nèi)標法－校準曲線法定量或按式(2)計算：
a´ai′´c
c = ¾¾¾¾¾¾…………………………………（2）
a′´ai
式中：
c¾¾血液樣品中乙醇濃度，單位為毫克每毫升(mg/ml)；
a¾¾血液樣品中乙醇的峰面積；
a′¾¾標準溶液中乙醇的峰面積；
ai′¾¾標準溶液中內(nèi)標物的峰面積；
ai¾¾血液樣品中內(nèi)標物的峰面積；
c¾¾標準溶液中乙醇濃度，單位為毫克每毫升(mg/ml)。
附 錄 a
（資料性附錄）
乙醇對照品和內(nèi)標氣相色譜圖
a.1 按色譜柱（1）條件得乙醇對照品和內(nèi)標氣相色譜圖，見圖a.1。
圖a.1 按色譜柱（1）條件得的乙醇對照品和內(nèi)標氣相色譜圖
a.2 按色譜柱（2）條件得乙醇對照品和內(nèi)標氣相色譜圖，見圖a.2。
圖a.2 按色譜柱（2）條件得的乙醇對照品和內(nèi)標氣相色譜圖
附 錄 b
（資料性附錄）
校準曲線
配制乙醇濃度為0.10、0.20、0.50、0.80、1.00、2.00、3.00mg/ml的水溶液，按6.1和6.2項下分析，每一濃度點取2份，以乙醇與內(nèi)標叔丁醇的峰面積比對乙醇濃度做標準曲線。