pei 轉(zhuǎn)染試劑 現(xiàn)貨試用
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產(chǎn)品名稱(chēng):pei prime™ aq 1 mg/ml liquid transfection reagent
產(chǎn)品貨號(hào):prime-aq100-100ml
產(chǎn)品描述:pei primetm是一種高性能的轉(zhuǎn)染試劑,為大量,低成本和可擴(kuò)展的瞬時(shí)基因表達(dá)設(shè)計(jì)。pei是常用的hek293和cho懸浮培養(yǎng)的瞬時(shí)轉(zhuǎn)染試劑。pei primetm是在哺乳動(dòng)物表達(dá)系統(tǒng)中生產(chǎn)重組蛋白、抗體和病毒的試劑。pfi primetm aq是一種1mg /ml, ph調(diào)整和消毒過(guò)濾的溶液,含有純pei primetm。
陽(yáng)離子聚合物--聚乙烯亞胺(polyethyleminine,pei)
聚乙烯亞胺是目前研究廣泛的陽(yáng)離子聚合物非病毒基因載體,它是由單體(-ch,ch,-nh-)構(gòu)成的具有伯胺﹑仲胺和叔胺基團(tuán)的水溶性聚合物。pei單體中每3個(gè)原子含1個(gè)氮,并構(gòu)成同的胺基。這些胺基的pka值不同,使 pei在較寬的ph范圍均可以被質(zhì)子化,這是pei有較強(qiáng)的結(jié)合dna和黏附細(xì)胞并作為基因轉(zhuǎn)導(dǎo)載體的重要原因。
分子量是決定其轉(zhuǎn)染效率重要因素,高分子量的pei具有高效的基因轉(zhuǎn)染效率,但因?yàn)槠浯罅空姾傻拇嬖谝约胺巧锝到庑?,可以?dǎo)致細(xì)胞膜去穩(wěn)定化,顯示出較大的細(xì)胞毒性,低分子量的pei(低于2kda)毒性低,但基因轉(zhuǎn)染效率也隨之降低。在hela、cos7、293t和cho四種細(xì)胞上評(píng)價(jià)交聯(lián)pei作為基因載體體外轉(zhuǎn)染pgl3的效率。發(fā)現(xiàn)二硫鍵含量和pei分子量大小決定了轉(zhuǎn)染效率。
不同分子量的pei轉(zhuǎn)染效率不同
枝狀的 800 kd pei 是*報(bào)道的可用于多種細(xì)胞轉(zhuǎn)染的試劑,枝狀的 25 kd pei(25b)用于hek293 細(xì)胞大規(guī)模瞬時(shí)轉(zhuǎn)染,其轉(zhuǎn)染效率較枝狀2 kd、600 kd、800 kd 或線(xiàn)狀 22 kd pei(22l)的高。
有研究報(bào)道,比較了 3 種商品化的 pei 轉(zhuǎn)染試劑 25 kd lpei、40 kdpei-max、pei pro,轉(zhuǎn)染 hek293 和 cho 細(xì)胞,pei pro 的轉(zhuǎn)染效率低于 25 kd lpei、40 kd pei-max,pei pro 的毒性*。經(jīng)過(guò)優(yōu)化,pei-max 的表達(dá)量?jī)?yōu)于 25 kd lpei。
pei 介導(dǎo)的瞬時(shí)轉(zhuǎn)染中 dna 和 pei 比例一般為1:2 ~ 1:3(w/w),提高轉(zhuǎn)染試劑比例會(huì)提高轉(zhuǎn)染效率,但是隨之細(xì)胞毒性也會(huì)增加。另外轉(zhuǎn)染時(shí)的細(xì)胞密度、dna-pei聚合物的大小、培養(yǎng)基的組成等都會(huì)影響轉(zhuǎn)染效果。
陽(yáng)離子聚合物--脂質(zhì)體
陽(yáng)離子脂質(zhì)體易穿透細(xì)胞膜,轉(zhuǎn)染效率要明顯高于其他轉(zhuǎn)染試劑,因而也廣泛用于瞬時(shí)轉(zhuǎn)染,但因其化學(xué)合成不易,商業(yè)化常用的脂質(zhì)體如 lipofectamine 價(jià)格較高,遠(yuǎn)貴于其他化學(xué)轉(zhuǎn)染試劑,因此只適合于小量瞬時(shí)轉(zhuǎn)染。
目前常用的脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染體系是將陽(yáng)離子脂質(zhì)體與 dna 溶液混合,以形成 dna 夾在脂質(zhì)雙分子層之間的結(jié)構(gòu)。hek293 細(xì)胞是非常適合進(jìn)行瞬時(shí)轉(zhuǎn)染的細(xì)胞,很容易接收外來(lái) dna,在合適的轉(zhuǎn)染條件下,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染效率可達(dá) 80% 以上, 使用商品化羅氏的 fugene hd 或者invitrogen 的 lipofectamine2000 的轉(zhuǎn)染效率甚至可達(dá)90% 以上。但是傳統(tǒng)的 cho 細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率相對(duì)較低,只有 40% ~ 60%。
thermo fisher 公司新開(kāi)發(fā)的expi293f 和 expicho 瞬時(shí)轉(zhuǎn)染系統(tǒng)的轉(zhuǎn)染效率和表達(dá)量有了較大的提升,但是商品化的轉(zhuǎn)染試劑盒培養(yǎng)基價(jià)格較貴,不太適用于產(chǎn)業(yè)化放大。
因此,目前pei轉(zhuǎn)染試劑,價(jià)格實(shí)惠深受廣大科研伙伴的熱愛(ài)。重點(diǎn)是超級(jí)便宜?。?!偷偷告訴你:據(jù)說(shuō)一次可配1l的量!1l??天啊,能用的完?如此便宜實(shí)惠的轉(zhuǎn)染試劑該如何操作呢?
目前,小編給大家謀福利了,“免費(fèi)試用pei轉(zhuǎn)染試劑”活動(dòng)!
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