api 3200™或3200 qtrap®lc-ms/ms液質(zhì)分析系統(tǒng)色譜分離流動相的制備：
1m甲酸銨溶液：稱取 63g甲酸銨，溶于1l hplc級的水中。
流動相a：在1l水 (hplc級) 中加入5ml 1m 甲酸銨溶液。
流動相b：在1l甲醇 (hplc級) 中加入5ml 1m 甲酸銨溶液。
樣品制備（水果與蔬菜基質(zhì)）
基于anastassiadies等人提出的方法[1]：
1. 稱量10g切碎的樣品；
2. 加入100µl 內(nèi)標(biāo)溶液(d5-莠去津 1µg/ml)；
3. 加入10ml乙腈，劇烈振搖；
4. 加入4g無水mgso4和1g的nacl；
5. 馬上渦旋混合，以防止mgso4共聚物的生成；
6. 振搖30s后，4300r/min離心5min；
7. 取出1ml初提液，轉(zhuǎn)移至含有150mg無水mgso4的離心管中；
8. 混合，5200r/min 離心1min；
9. 取出500µl上清液，用水將稀釋到1ml，得到提取液濃度約為0.5g/ml。
基于klein and alder等人提出的方法[2, 3]：
1. 在5g或10g樣品中，加入水到10ml；
2. 加20ml甲醇，使用ultraturrax 組織勻漿機勻漿2min ；
3. 有時需要過濾或離心；
4. 加入nacl 溶液 (100ml水中含20 g nacl )，每6ml加入nacl溶液2ml ；
5. 用5ml樣品溶液浸泡chemelut 柱；
6. 5min后，用16ml二氯甲烷洗脫；
7. 40℃揮發(fā)至干；
8. 用甲醇與水的混合溶液1.25ml (甲醇0.25ml，水1ml) 重新溶解；
9. 用0.45µm濾膜過濾。
基于lehotay et al.[4]提出的方法：
1. 使用molinex 混合器或類似設(shè)備勻質(zhì)水果或蔬菜樣品；
2. 加入乙腈，(15.0± 0.05)g勻質(zhì)的樣品加乙腈15ml，超聲提取2min后，混旋5min；
3. 加入6g無水mgso4和1.5g nacl的混合物，劇烈振搖1min；
4. 3000 r/min 離心5 min；
5. 取5ml上層溶液，加入1.8g無水mgso4 和 0.3g bondesil c8吸附劑；
6. 振搖20s；
7. 使用eppendorf 5301型濃縮儀，或類似設(shè)備揮發(fā)至干；
8. 用乙腈/水＝1/9的溶液1ml重新溶解樣品；
9. 12000r/min高速離心 2min；
10. 上清液轉(zhuǎn)入自動進樣器的進樣瓶中備用。
樣品制備（蜂蜜、果汁、果酒）[5]
1. 預(yù)處理：
蜂蜜樣品，對無結(jié)晶的實驗室樣品將其攪拌均勻?qū)τ薪Y(jié)晶的樣品，在密閉情況下，置于不超過60 ℃的水浴中溫?zé)幔袷?，待樣品全部融化后攪勻，迅速冷卻至室溫分出0.5 kg作為試樣，置于樣品瓶中，密封，并標(biāo)明標(biāo)記。果汁、果酒樣品，將取得的全部原始樣品倒入潔凈的搪瓷混樣桶內(nèi)，充分?jǐn)嚢韫鲃?，再將混勻樣品分裝出兩份(每份500ml),密封，作為試樣，標(biāo)明標(biāo)記。
2. 提?。?
稱取15 g試樣(精確至0.01 g)于250ml具塞三角瓶中，加入30ml水，于40℃振蕩水浴上，振蕩溶解15min。加入10ml丙酮，然后將瓶中內(nèi)容物移入50ml分液漏斗中。用40ml二氯甲烷分?jǐn)?shù)次洗滌三角瓶，并將洗液倒入分液漏斗中，小心排氣，用力振搖8次，靜置分層，將下層有機相通過裝有*的筒形漏斗，收集于200ml雞心瓶中。再先后加入5ml丙酮和40ml二氯甲烷于分液漏斗中，振搖1min，靜置、分層后收集。如此重復(fù)提取兩次，合并提取液，將提取液于40℃水浴旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至約1ml，待凈化。
3. 凈化：
在envi-carb柱中加入約2 cm高*，將該柱連接在氨基sep-pak柱頂部，并將串聯(lián)柱放入下接雞心瓶的固定架上。加樣前先用4ml乙睛+甲苯(3+1)預(yù)洗柱，當(dāng)液面到達(dá)硫酸鈉的頂部時，迅速將樣品提取液轉(zhuǎn)移至凈化柱上，再用2ml乙睛+甲苯(3+1)洗滌樣液瓶三次，并將洗液移入柱中。在串聯(lián)柱上加上50ml貯液器，用25ml乙睛 +甲苯(3+1)洗脫農(nóng)藥，合并于雞心瓶中，并在40℃水浴中旋轉(zhuǎn)濃縮至約0.5ml。對氨基甲酸醋類農(nóng)藥檢測，加入5ml甲醇進行溶劑交換兩次，后定容1ml,混勻，用于液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜測定。對于其他農(nóng)藥檢測，加入25ml正己烷進行溶劑交換兩次，后使樣液體積約為1ml，加入40µl內(nèi)標(biāo)溶液，混勻，用于測定
色譜分離條件：
agilent 1100 系統(tǒng)：g1312a二元泵系統(tǒng)、g1367a型自動進樣器、柱溫箱。
色譜柱：phenomenex synergi fusion-rp反相柱，50 mm×2 mm，粒徑 4µm。
流動相：a相—h2o+5mm 甲酸銨；b相—甲醇+5mm 甲酸銨
ms/ms 檢測：
api 3200™ 或3200 qtrap® lc-ms/ms液質(zhì)分析系統(tǒng)；turboionspray®離子源，負(fù)離子模式，mrm 掃描方式