土壤蔗糖酶(solid-sucrase, s-sc）試劑盒說明書
for research use only
僅供研究用
貨號(hào)：qys-235096
分光光度法 50 管/24 樣
土壤蔗糖酶(solid-sucrase, s-sc）試劑盒說明書測(cè)定意義：
s-sc 能夠水解蔗糖變成相應(yīng)的單糖而被機(jī)體吸收，其酶促作用產(chǎn)物與土壤中有機(jī)質(zhì)、氮、磷含量，微生物數(shù)量及土壤呼吸強(qiáng)度密切關(guān)，是評(píng)價(jià)土壤肥力的重要指標(biāo)。
測(cè)定原理：
s-sc 催化蔗糖降解產(chǎn)生還原糖，進(jìn)一步與 3，5－二硝基水楊酸反應(yīng)，生成棕紅色氨基化合物，在 510nm 有特征光吸收，在一定范圍內(nèi) 510nm 光吸收增加速率與 s-sc 活性成正比。
自備用品：
可見分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1ml 玻璃比色皿、研缽、冰、甲苯（不允許快遞）和蒸餾水。
試劑組成和配制：
試劑一：甲苯 5ml×1 瓶，4℃保存；（自備）
試劑二：液體 15ml×1 瓶，4℃保存；
試劑三：粉劑×1 瓶，4℃保存；臨用前每瓶加入 40ml 蒸餾水充分溶解備用；用不完的試劑4℃保存；
試劑四：液體 30ml×1 瓶，4℃保存。
土壤蔗糖酶(solid-sucrase, s-sc）試劑盒說明書測(cè)定步驟和加樣表：
試劑名稱 測(cè)定管 對(duì)照管
風(fēng)干土樣（g） 0.1 0.1
試劑一（μl） 15 15
振蕩混勻，使土樣全部濕潤(rùn)，37℃水浴 15min
試劑二（μl） 250 250
試劑三（μl） 750
蒸餾水（μl） 750
充分混勻，放入 37℃水浴培養(yǎng) 24 小時(shí)，10000 g，4℃，離心 5min，取上清液
上清液（μl） 200 200
試劑四（μl） 500 500
充分混勻，放入沸水浴中煮沸 5min（蓋緊，以防止水分散失），流水冷卻后充分混勻，蒸餾水稀釋 10 倍后（可以吸取 100μl，加入 900μl 蒸餾水稀釋；如果吸光度大于 4，可以適當(dāng)加大稀釋倍數(shù)），510nm 處蒸餾水調(diào)零，讀吸光值 a。計(jì)算 δa=a 測(cè)定管-a 對(duì)照管。每個(gè)測(cè)定管需設(shè)一個(gè)對(duì)照管。
s-sc 活性計(jì)算：
標(biāo)準(zhǔn)條件下測(cè)定的回歸方程為 y = 4.9x -0.062；x 為標(biāo)準(zhǔn)品濃度（mg/ml），y 為吸光值。單位的定義：每天每 g 土樣中產(chǎn)生 1mg 還原糖定義為一個(gè) s-sc 活力單位。
s-sc 活力(u /g 土樣)=( δa+0.062) ÷4.9×10×v 反總÷w÷t =20.7×(δa+0.062) 10：稀釋倍數(shù)；t：反應(yīng)時(shí)間，1d； v 反總：反應(yīng)體系總體積：1.015ml；w：樣本質(zhì)量，