hacat細(xì)胞是人類永生化表皮細(xì)胞，由角質(zhì)形成細(xì)胞培育而來(lái)的，保留了角質(zhì)形成細(xì)胞分化能力，是非腫瘤來(lái)源的人正常皮膚永生化角質(zhì)形成細(xì)胞株，與正常人角質(zhì)形成細(xì)胞分化特性相似，可以繁殖150代以上，但不是腫瘤細(xì)胞，不具有腫瘤特性。
細(xì)胞名稱
hacat（人永生化角質(zhì)形成細(xì)胞）
細(xì)胞來(lái)源
一位62歲患有黑色素瘤男性的病灶外圍正常皮膚
形態(tài)
上皮細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性
貼壁生長(zhǎng)
營(yíng)養(yǎng)體系
89%mem(abs9503)+10%胎牛血清優(yōu)級(jí)(abs972)+1%雙抗(abs9244)+0.2%牛腦垂體提取物(abs9119)
傳代
1:3—1:5，傳代周期2-3天
凍存
無(wú)血清細(xì)胞凍存液plus(abs9478)/90%培養(yǎng)液+10%dmso
應(yīng)用
皮膚生物學(xué)和分化研究
該細(xì)胞較難消化，胰蛋白酶-edta消化液(0.25%) ，含酚紅(abs47014938)消化5min作用，有時(shí)可能高達(dá)10min，主要由于細(xì)胞不同分化程度和融合度而異。注意消化前一定要用pbs清洗細(xì)胞2-3次，鋪板時(shí)一定要均勻，因?yàn)閔acat成片生長(zhǎng)，鋪板不勻會(huì)存在局部生長(zhǎng)過(guò)密難以消化，生長(zhǎng)稀疏部分容易消化過(guò)度的情況。
圖a 低ca2+條件下hacat細(xì)胞基礎(chǔ)狀態(tài)和圖b高ca2+條件下hacat細(xì)胞分化狀態(tài)
10%fbs培養(yǎng)體系中的ca2+足以誘導(dǎo)該細(xì)胞分化，也就是說(shuō)，正常培養(yǎng)體系下，該細(xì)胞會(huì)逐漸分化，分化前細(xì)胞近紡錘形，排列較松散，分化后細(xì)胞向立方體發(fā)展，排列緊密，呈片狀生長(zhǎng)。
低鈣離子條件下，hacat增殖更快，k14的表達(dá)僅限于表皮基底層，而k10和總合蛋白的存在表明表型分化程度更高。通過(guò)免疫熒光實(shí)驗(yàn)證實(shí)了hacat細(xì)胞分化表型的獲得，與第6天相比，分化標(biāo)記k10在hacat細(xì)胞中的表達(dá)在第14天顯著增加，幾乎100%的細(xì)胞是陽(yáng)性的，這可能和細(xì)胞密度有關(guān)。
牛腦垂體物常用作無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)的生長(zhǎng)補(bǔ)充劑，可促進(jìn)上皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞和黑色素細(xì)胞增殖，廣泛用作各種上皮細(xì)胞和黑色素細(xì)胞培養(yǎng)中的補(bǔ)充劑。此外，其具有抗氧化能力，可對(duì)抗過(guò)氧化氫誘導(dǎo)的細(xì)胞壞死，蛋白質(zhì)氧化，膜破碎和dna損傷。
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absin胞胞巴適本期推薦產(chǎn)品
貨號(hào)
品名
規(guī)格
abs9119
牛腦垂體提取物
20mg/20mg*5
abs972
胎牛血清（優(yōu)級(jí)）
500ml
abs9503
mem培養(yǎng)基（含neaa，含l-谷氨酰胺，不含丙酮酸鈉，含hepes）
500ml
abs9244
青霉素-鏈霉素溶液（100×雙抗）
100ml
abs9478
無(wú)血清細(xì)胞凍存液plus
100ml
參考文獻(xiàn)
[1] wilson vg. growth and differentiation of hacat keratinocytes. methods mol biol. 2014;1195:33-41. doi: 10.1007/7651_2013_42. pmid: 24155234.
[2] colombo i, sangiovanni e, maggio r, et al. hacat cells as a reliable in vitro differentiation model to dissect the inflammatory/repair response of human keratinocytes. mediators inflamm. 2017;2017:7435621. doi:10.1155/2017/7435621
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