孟氏尖旋線蟲(chóng)pcr檢測(cè)試劑盒反應(yīng)五要素:
參加pcr反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dntp、模板和mg2+
引物:引物是pcr特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,pcr 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板dna互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板dna序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用pcr就可將模板dna在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:g+c含量以40-60%為宜,g+c太少擴(kuò)增效果不佳,g+c過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。atgc*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致pcr失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
豚鼠*(camp)elisa檢測(cè)試劑盒
豚鼠環(huán)磷酸鳥(niǎo)苷(cgmp)elisa檢測(cè)試劑盒
豚鼠過(guò)氧化脂質(zhì)/乳過(guò)氧化物酶(lpo)elisa檢測(cè)試劑盒
豚鼠鉤端螺旋體igg(leptospira)elisa檢測(cè)試劑盒
豚鼠肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(hgf)elisa檢測(cè)試劑盒
豚鼠甘油醛-3-磷酸脫氫酶(gapdh)elisa檢測(cè)試劑盒
豚鼠干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長(zhǎng)因子(scf/mgf)elisa檢測(cè)試劑盒
豚鼠鈣調(diào)素(cam)elisa檢測(cè)試劑盒
豚鼠端粒酶(te)elisa檢測(cè)試劑盒
豚鼠膽囊收縮素/腸促*肽(cck)elisa檢測(cè)試劑盒
豚鼠*脂酶(che)elisa檢測(cè)試劑盒
豚鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4(mcp-4/ccl13)elisa檢測(cè)試劑盒
豚鼠單核細(xì)胞趨化蛋白1(mcp-1/ccl2/mcaf)elisa檢測(cè)試劑盒
豚鼠單胺氧化酶(mao)elisa檢測(cè)試劑盒
豚鼠催產(chǎn)素(ot)elisa檢測(cè)試劑盒
豚鼠促腎上腺皮質(zhì)激素(acth)elisa檢測(cè)試劑盒
豚鼠促卵泡素(fsh)elisa檢測(cè)試劑盒
豚鼠雌激素(estrogen)elisa檢測(cè)試劑盒
豚鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白(ifabp)elisa檢測(cè)試劑盒
豚鼠表皮生長(zhǎng)因子(egf)elisa檢測(cè)試劑盒
豚鼠白三烯d4(ltd4)elisa檢測(cè)試劑盒