pcr技術(shù)與離心機的關(guān)系可以說是密不可分。
從20世紀(jì)80年代中期開始,聚合酶鏈反應(yīng)(polym erase chain reac tion,pcr)發(fā)展起來的體外核酸擴增技術(shù)。
因為優(yōu)點眾多又突出,比如特異﹑敏感、產(chǎn)率高﹑快速﹑簡便、重復(fù)性好、易自動化等,所以那時候被稱為醫(yī)學(xué)生物領(lǐng)域的一項革命性創(chuàng)舉和里程碑。
查閱相關(guān)資料獲悉人類對核酸的研究有100多年的歷史了,從20世紀(jì)60年代末、70年代初人們致力于研究基因的體外分離技術(shù)。
k orana于1971年最早提出核酸體外擴增的設(shè)想,該設(shè)想在1985年被mullis等人實現(xiàn)。他們發(fā)明了具有劃時代意義的聚合酶鏈反應(yīng)。其原理類似于dna的體內(nèi)復(fù)制,只是在試管中給 dna的體外合成提供了合適的條件:模板dna,寡核苷酸引物, dna聚合酶,合適的緩沖體系,dna變性、復(fù)性及延伸的溫度與時間等。
但mullis最初使用的dna聚合酶是klenw酶,它不耐高溫,90℃時會變性失活,每次循環(huán)都要重新添加同時其體外擴增的保真性較差,使得 pcr技術(shù)在一段時間內(nèi)沒能引起生物醫(yī)學(xué)界的足夠重視。直到1988年,saiki等人從嗜熱桿菌( hem us aquaticus)中提取到一種耐熱dna聚合酶(此酶被命名為taqdna多聚酶)才使得pcr技術(shù)得以廣泛應(yīng)用。
pcr技術(shù)模擬dna的天然復(fù)制過程,其特異性依賴于與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物,該原理主要包括3個基本反應(yīng)過程:變性一---退火—一--延伸。變性主要是指雙鏈 dna的變性,即雙鏈 dna經(jīng)加熱至93℃左右,其熱穩(wěn)定性降低,配對堿基之間的氫鍵斷裂,使雙鏈dna成為單鏈,以便與引物結(jié)合。退火是指單鏈 dna在溫度降低時與引物的復(fù)性(稱為退火)。在此過程中,引物與單鏈 dna模板仍然按照堿基互補的方式配對。延伸是指引物與dna模板按堿基互補的原則配對后,在taqdna聚合酶的作用下,以dntp為反應(yīng)原料,進行體外的半保留復(fù)制,合成一條新的與模板dna鏈互補的新鏈。
經(jīng)重復(fù)循環(huán)變性—-退火-—--延伸3個過程,就可獲得更多的“半保留復(fù)制鏈而且這種新鏈又可成為下次循環(huán)的模板。每完成一次循環(huán)需2~4 m in 2~3 h就能將目的基因擴增、放大幾百萬倍。
由此可見pcr技術(shù)相當(dāng)復(fù)雜,人們除了推進實驗技術(shù),還在想法設(shè)法的始得實驗技術(shù)更成熟,那么如何才能實現(xiàn),答案是借助儀器,每一項實驗需要的實驗儀器需要更精確更適合這樣才能更進一步的提升實驗效率。
比如核酸檢測就需要用到核酸檢測離心機。
通過專業(yè)離心機廠家上海盧湘儀離心機儀器有限公司我們可以了解到:
核酸檢測是在pcr實驗室進行,核酸是生物體內(nèi)的高分子化合物,包括脫氧核糖核酸dna和核糖核酸rna兩大類,廣泛存在于所有動植物、微生物及生物體內(nèi)。核酸是基本的遺傳物質(zhì),在生長、遺傳、變異等一系列重大生命現(xiàn)象中起決定性的作用。通過核酸檢測離心機的檢測,對腫瘤的發(fā)生,病毒的感染以及射線對人體的影響等都有重要的臨床意義。