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        AC29 貼壁細(xì)胞操作步驟

        發(fā)布時間:2024-06-05
        細(xì)胞:ac29細(xì)胞
        中文名稱:小鼠惡性間皮瘤細(xì)胞
        生長特性:貼壁細(xì)胞
        培養(yǎng)基:1640培養(yǎng)基 血清:10%fbs(gibco胎牛血清)
        熒光株:ac29-rfp熒光標(biāo)記細(xì)胞株ac29-gfp熒光標(biāo)記細(xì)胞株ac29-luc熒光標(biāo)記細(xì)胞株
        耐藥株:ac29-ddp耐藥株ac29-ptx耐藥株ac29-adm耐藥株
        細(xì)胞檢測服務(wù):ac29細(xì)胞種屬鑒定(細(xì)胞檢測技術(shù)服務(wù)可直接咨詢客服 )
        貼壁細(xì)胞簽收操作:
        1. 收到細(xì)胞后請盡快更換為含 15% 血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶培養(yǎng)基,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加 10% 的血清(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過 72 小時)
        2. 貼壁細(xì)胞收到后切忌立刻進行消化,將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育 6-8 小時或過夜再做消化傳代。
        (網(wǎng)絡(luò)信息主針對網(wǎng)絡(luò)推廣作用,僅供參考,細(xì)胞培養(yǎng)血清注意事項請咨詢細(xì)胞庫管理員,以細(xì)胞庫管理員提供給您的信息為準(zhǔn),操作前,如果有不明白之處,先咨詢細(xì)胞庫管理員,避免不必要的損失;)
        細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴(yán)格遵照無菌操作)
        1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,pbs 緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% yi酶進行消化細(xì)胞(注意把握消化時間,通??刂圃?1-2min)
        2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉yi酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
        3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
        4. 注意培養(yǎng)基 ph 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達到 80%以后重復(fù) 1 項操作或者凍存。
        內(nèi)皮抑素(endostatin)一種具有抑制血管生長的蛋白質(zhì).
        休眠蛋白(restin)是內(nèi)皮抑素的同源蛋白質(zhì),它來源于膠原蛋白xv的羧端非膠原蛋白結(jié)構(gòu)域(nc1)。
        為了研究鼠源休眠蛋白對內(nèi)皮細(xì)胞生長的影響, 利用rt-pcr從鼠肌肉中擴增出它的基因, 克隆入原核表達載體pqe32。
        誘導(dǎo)后, 重組蛋白質(zhì)以包涵體形式高效表達, 表達量約占菌體總蛋白質(zhì)的60%~70%。
        重組蛋白質(zhì)經(jīng)純化復(fù)性后, 可以特異地抑制bfgf刺激的牛主動脈內(nèi)皮細(xì)胞的增殖, 但是休眠蛋白的抑制活性比內(nèi)皮抑素活性稍低.
        流式細(xì)胞儀檢測發(fā)現(xiàn), 休眠蛋白可以引起內(nèi)皮細(xì)胞的細(xì)胞周期的改變, 并且引起細(xì)胞凋亡。
        關(guān)鍵詞:培養(yǎng)箱 流式細(xì)胞儀
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