如何選擇transwell® 通透性支持物的材質(zhì)和孔徑？
細胞和組織培養(yǎng)技術在基礎和應用生命科學領域的重要性日益提高。為盡可能的模擬體內(nèi)環(huán)境以培養(yǎng)某些特殊的細胞系，使用帶有多微孔膜的通透性支持物培養(yǎng)這些細胞成為基本的方法。通透性支持物可以有效改善極性細胞的培養(yǎng)，因為這些支持物允許細胞從其基底面和頂面分泌和吸收分子，從而以更為自然的方式進行代謝。
對于表皮細胞和其他種類的細胞，利用通透性支持物在體外培養(yǎng)使得細胞可以在更為自然的極性條件下生長和研究。同時提高了細胞的分化水平，使得體外生長的細胞在形態(tài)和功能上更為接近體內(nèi)的細胞。還可以進行運輸，吸收和分泌等細胞功能的研究，因為在通透性支持物上生長的細胞可以很方便且無干擾的接近其基底面和頂面的細胞膜結構。使用通透性支持物進行細胞培養(yǎng)對于實驗細胞學研究是一個*的工具。
選擇合適的transwell® 膜
康寧的transwell通透性支持物可以提供三種膜材料：聚碳酯(pc)，聚酯(pet)和膠原包被的聚四氟乙烯(ptfe)，實驗中可以根據(jù)需要選擇合適的膜材料。它們的詳細信息如下：
選擇合適的孔徑
在實驗中使用transwell®通透性支持物時選擇合適的孔徑也是十分重要的。表2總結了通透性支持物的常規(guī)應用和推薦使用的孔徑。小孔徑的tanswell膜(0.1um)主要應用于藥物轉(zhuǎn)導研究。細胞侵襲，趨化性和運動性研究通常采用3.0um或以上的孔徑的tranwell膜。細胞從膜的孔中遷徙通過的能力與選用的細胞系及培養(yǎng)條件有關，同時也與孔徑相關。小于3.0um孔徑條件下，細胞不會遷徙通過。對于一些要求嚴格的實驗，康寧建議在實驗中選用一系列孔徑作為對照來確定哪種尺寸于你的細胞培養(yǎng)和特殊應用。還有一 個方法就是參照已經(jīng)發(fā)表的文獻的推薦。
使用提示
1. 通透性支持物上的細胞形態(tài)和密度受濾膜孔徑的影響。
2. 一些孔徑大的膜可以容許細胞穿過。
3. 在通透性支持物上生長的細胞的貼附對于起始接種密度很敏感。初次使用應接種不同密度保證生長。
4. 在培養(yǎng)之前將通透性支持物在培養(yǎng)基中孵育可以改善細胞得貼附和分布。
5. 與塑料培養(yǎng)表面一樣，細胞在通透性支持物上仍然需要細胞外支架的包被。
6. 透明的transwell是帶有透明的，經(jīng)組織培養(yǎng)處理的聚酯膜，細胞在相差顯微鏡下很容易被觀察。
7. transwell-col帶有ptfe膜，經(jīng)過等摩爾數(shù)的i型和iii型牛胎盤膠原處理。從而形成了覆蓋在濾膜纖維上的具有生物穩(wěn)定性的膠原骨架。這些transwell嵌套適用于需生物包被的細胞培養(yǎng)。