酵母雙雜交系統(tǒng)是一種鑒定蛋白質(zhì)相互作用的研究方法,是基于對(duì)酵母轉(zhuǎn)錄因子gal4的性質(zhì)研究之上。gal4包括兩個(gè)功能結(jié)構(gòu)域:一是與dna上游激活序列(upstream activating sequence uas)結(jié)合的dna結(jié)合結(jié)構(gòu)域(binding domain, bd), 該結(jié)構(gòu)域位于n端1-174位氨基酸殘基區(qū)段;另一個(gè)是轉(zhuǎn)錄激活結(jié)構(gòu)域(activation domain, ad),該結(jié)構(gòu)域位于c端768-881位氨基酸殘基區(qū)段。這兩個(gè)功能結(jié)構(gòu)域是兩個(gè)結(jié)構(gòu)相互分離,功能又相互獨(dú)立。一般情況下,單獨(dú)的bd可以和uas結(jié)合但并不引起轉(zhuǎn)錄,單獨(dú)的ad則不能與uas結(jié)合,只有當(dāng)bd與ad分別表達(dá)的融合蛋白由于相互作用而導(dǎo)致兩者在物理空間上相互接近時(shí),bd與ad才能與uas結(jié)合從而引起啟動(dòng)子下游基因的轉(zhuǎn)錄。
酵母雙雜交主要功能發(fā)現(xiàn)新的與已知蛋白質(zhì)互作的蛋白質(zhì);
確認(rèn)兩個(gè)蛋白質(zhì)之間的相互作用;
鑒定參與蛋白質(zhì)相互作用的區(qū)域;
酵母雙雜交技術(shù)優(yōu)勢(shì)真實(shí):蛋白質(zhì)互作發(fā)生在酵母細(xì)胞內(nèi),反應(yīng)互作真實(shí)水平;
靈敏:可檢測(cè)微弱和短暫的蛋白質(zhì)互作作用;
操作簡(jiǎn)單:無(wú)需蛋白質(zhì)抽提、純化等繁瑣步驟;
通量大,可構(gòu)建文庫(kù),一次性完成數(shù)萬(wàn)蛋白質(zhì)相互作用的篩選;
結(jié)果直觀:通過(guò)藍(lán)白斑篩選可以直觀地找出有互作蛋白的陽(yáng)性克隆。
酵母雙雜交定制服務(wù)
文庫(kù)構(gòu)建(周期:4-6周)
項(xiàng)目流程:
樣本選擇:
樣品類型
樣品需求
保存條件(℃)
運(yùn)輸條件
備注
動(dòng)物組織
>0.5g
-80
干冰
樣本需標(biāo)準(zhǔn)清楚名稱,分類等信息。
貼壁/懸浮細(xì)胞
>1*107細(xì)胞
-80
干冰
種子
>1g
-80
干冰
植物組織
>1g
-80
干冰
交付標(biāo)準(zhǔn):
產(chǎn)品名稱
交付標(biāo)準(zhǔn)
儲(chǔ)存條件
備注
酵母工作液甘油菌
>100管(1m/管)
-80℃
篩選用載體套裝
1套
-20℃
擴(kuò)繁保存
篩庫(kù)用酵母菌株甘油菌
1套
-80℃
建庫(kù)項(xiàng)目報(bào)告
1份
-
文庫(kù)篩選(周期:4-6周)
項(xiàng)目流程:
交付標(biāo)準(zhǔn):
產(chǎn)品名稱
交付標(biāo)準(zhǔn)
儲(chǔ)存條件
備注
構(gòu)建好的bd載體
1管
-20℃
公司構(gòu)建
陽(yáng)性克隆酵母菌液
根據(jù)具體項(xiàng)目結(jié)果進(jìn)行交付
-80℃
陽(yáng)性克隆質(zhì)粒
根據(jù)具體項(xiàng)目結(jié)果進(jìn)行交付
-20℃
篩選項(xiàng)目報(bào)告
1份
--
互作驗(yàn)證(周期:2-3周)
項(xiàng)目流程:
交付標(biāo)準(zhǔn):
產(chǎn)品名稱
交付標(biāo)準(zhǔn)
驗(yàn)證結(jié)果報(bào)告
1份
翌圣酵母雙雜定制服務(wù)-技術(shù)優(yōu)勢(shì)利用mrna來(lái)建庫(kù)。采取總rna純化出mrna的方式來(lái)建庫(kù),排除了樣本中的核糖體rna的污染,增加了篩選樣本的有效性;大多數(shù)公司是采用總rna來(lái)擴(kuò)增建庫(kù)的;
實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)嚴(yán)謹(jǐn),保證陽(yáng)性率。全程設(shè)置了嚴(yán)格的陽(yáng)性對(duì)照,過(guò)程控制達(dá)到陽(yáng)性對(duì)照的標(biāo)準(zhǔn)才會(huì)繼續(xù)往下實(shí)驗(yàn),如果建庫(kù)過(guò)程達(dá)不到陽(yáng)性對(duì)照水平是不收取建庫(kù)的費(fèi)用的。在篩選的過(guò)程中,同時(shí)采用了從松弛型篩選到嚴(yán)謹(jǐn)型篩選和從嚴(yán)謹(jǐn)型篩選到松弛型篩選兩條路線盡最大的可能保證篩選到陽(yáng)性結(jié)果。
團(tuán)隊(duì)經(jīng)驗(yàn)豐富。研發(fā)團(tuán)隊(duì)成員深耕酵母雜交技術(shù)領(lǐng)域十多年,擁有豐富的篩選經(jīng)驗(yàn);
售前售中高效響應(yīng)。每個(gè)項(xiàng)目,由專業(yè)技術(shù)支持全程跟進(jìn),及時(shí)對(duì)接項(xiàng)目進(jìn)度及解答售前問(wèn)題;
貼心售后。贈(zèng)送配套的篩庫(kù)載體菌株、篩庫(kù)完整方案和售后指導(dǎo)。根據(jù)客戶要求,提供cns文章級(jí)別的結(jié)果圖片。
相關(guān)產(chǎn)品上新
產(chǎn)品名稱
規(guī)格
貨號(hào)
價(jià)格
酵母質(zhì)粒提取試劑盒
50t/100t
70201es
300/520
核蛋白酵母雙雜交試劑盒
4t
70202es
8775
上新優(yōu)惠活動(dòng)
定制服務(wù):活動(dòng)期間,訂購(gòu)翌圣酵母雙雜定制服務(wù),即送訂單金額×5%的酵母質(zhì)粒提取試劑盒(70201es)或相關(guān)分子試劑;
核蛋白酵母雙雜交建庫(kù)試劑盒(70202es):活動(dòng)期間,訂購(gòu)該產(chǎn)品可享目錄價(jià)8折,再送50t 酵母質(zhì)粒提取試劑盒(70202es)。
活動(dòng)時(shí)間:即日起至2023年12月31日。
※該活動(dòng)所有解釋權(quán)歸翌圣生物科技(上海)股份有限公司所有。
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貨號(hào)
產(chǎn)品定位
trieasy™ls total rna extraction reagent 液體總rna提取試劑(同trizol ls)
19201es
rna提取
molpure®trieasy plus total rna kit 總rna提取試劑盒(帶離心柱)
19211es
molpure®cell/tissue total rna kit 細(xì)胞/組織總rna提取試劑盒
19221es
molpure®plant rna kit 植物rna提取試劑盒
19291es
molpure®plant plus rna kit 多糖多酚植物rna提取試劑盒
19292es
molpure®bacterial rna kit 細(xì)菌rna提取試劑盒
19301es
molpure®viral dna/rna kit 病毒dna/rna提取試劑盒
19321es
x-α-gal 5-溴-4-氯-3-吲哚-α-d-吡喃半乳糖苷
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篩選底物
aureobasidin a(aba) 金擔(dān)子素a
60231es
篩選抗生素