【摘要】 目的建立復(fù)方*片中*的含量測(cè)定方法。方法采用液相色譜法，ods c18（4.6 mm×250 mm，5 μm），以甲醇-水-冰醋酸（48∶52∶1）為流動(dòng)相，流速1.0 ml·min-1，檢測(cè)波長(zhǎng)287 nm。結(jié)果*在13.75～110.00 μg·ml-1的進(jìn)樣濃度范圍內(nèi)與其峰面積呈良好的線性關(guān)系（r=0.999 8），平均回收率為97.10%（rsd=0.63%，n=6）。結(jié)論該方法操作簡(jiǎn)便、結(jié)果可靠，重復(fù)性好，可用于復(fù)方*片中*的分析。
【關(guān)鍵詞】 液相色譜 復(fù)方*片 *
abstract:objectiveto develop a method for determining thecontent of silymarin in fufang yiganling tablets. methodshplcanalysis was carried out at the following conditions: cromasil c18column（4.6 mm×250 mm,5 μm）, phase:methanol-water-aceticacid（48∶52∶1）,the detection wavelength was at 287 nm the flow ratewas 1.0 ml·min-1. resultsthe standard curve was linear over therange of 5.9～29.5 μg·ml-1 （r=0.999 8）,and the average recovery was97.10% with rsd of 0.63%（n=6）; conclusionthis method issimple,reliable and reproducible,it can be used for thequantitative determination of the content of silymarin in fufangyiganling tablets.
key words:hplc; fufang yiganlingtablets; silymarin
復(fù)方*片具有益肝滋腎，解毒祛濕的功效。全方由*、五仁醇浸膏組成，臨床用于肝腎陰虛，濕毒未清引起脅痛、納差、腹脹、腰酸乏力、尿黃等癥；或慢性肝炎轉(zhuǎn)氨酶增高者。其主要組成藥物*為菊科植物水飛薊silybummarianum（l.）gaertn.的果實(shí)，經(jīng)提取精制所得的松散粉末，主要含黃酮醇類成分，其中*具有zui強(qiáng)的活性，并且很大程度上是*所具有的特性的原因，具有清熱解毒、舒肝利膽之功。該品種沒(méi)有藥典標(biāo)準(zhǔn)，部頒標(biāo)準(zhǔn)中的含量測(cè)定方法專屬性不強(qiáng)，度也不夠高?！吨袊?guó)藥典》2005版ⅰ部已載有*的含量測(cè)定方法，因此，建立液相色譜法測(cè)定復(fù)方*片中君藥的指征成分*的含量就尤為必要。本實(shí)驗(yàn)采用hplc法測(cè)定復(fù)方*片中*的含量，以期能較全面有效地控制該制劑的質(zhì)量。
1 儀器與材料
島津lc-10atvp泵，spd-10avp紫外檢測(cè)器；*對(duì)照品（0856-200203，中國(guó)藥品生物制品檢定所）；復(fù)方*片由吉林敖東洮南藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)；超純水；甲醇為色譜純；冰醋酸為分析純。
2 方法與結(jié)果
2.1 色譜條件液相色譜柱為odsc18（shimadzu，4.6 mm×250 mm，5 μm）；流動(dòng)相為甲醇-水-冰醋酸（48∶52∶1）；檢測(cè)波長(zhǎng)287nm；流速1.0 ml·min-1；柱溫35℃。
2.2 對(duì)照品溶液的制備精密稱取*對(duì)照品適量，加甲醇制成每毫升含*0.05 mg的溶液，即得。
2.3 供試品溶液的制備取本品5片，除去糖衣，精密稱定，研細(xì)（過(guò)100目篩），取0.5 g，精密稱定，置150ml具塞錐形瓶中，加石油醚（60～90℃）50 ml，置90℃水浴上加熱回流1 h，放冷，傾出石油醚，用干燥濾紙過(guò)濾，再用石油醚40ml，分次洗滌容器內(nèi)殘?jiān)盀V紙，濾過(guò)，揮干溶劑后，將濾紙放入原錐形瓶中，精密加甲醇50 ml，稱定重量，置水浴上加熱回流1h，放冷，稱重，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，棄去初濾液，精密量取續(xù)濾液1 ml，置10ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。
2.4 線性關(guān)系考察精密稱取*對(duì)照品13.75 mg，置50ml量瓶，加甲醇使溶解并稀釋至刻度，搖勻。再分別精密吸取0.5，1.0，2.0，3.0，4.0 ml到10ml容量瓶，加甲醇稀釋至刻度，搖勻。再分別精密吸取20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖。以進(jìn)樣濃度為橫坐標(biāo)，以*和異*的峰面積和為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，得回歸方程為：y =1017.40+10 376.02x, r=0.999 8。表明*在13.75～110.00μg·ml-1的進(jìn)樣濃度范圍內(nèi)，與峰面積線性關(guān)系良好。線性回歸曲線見(jiàn)圖1。
2.5陰性樣品干擾考察取*對(duì)照品、復(fù)方*片供試品溶液、不含*的空白溶液，依法進(jìn)樣測(cè)定，結(jié)果在*保留時(shí)間處無(wú)干擾峰影響。
2.6 精密度實(shí)驗(yàn)精密吸取供試品溶液20μl，重復(fù)進(jìn)樣6次，記錄色譜圖，結(jié)果rsd為0.24%（n=6）。
2.7 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)取精密度項(xiàng)下的供試品溶液，在0，2，4，8 h 先后吸取20μl注入液相色譜儀，進(jìn)行穩(wěn)定性考察，結(jié)果rsd為0.60%。
2.8 重現(xiàn)性實(shí)驗(yàn)取同一批樣品，按正文方法制備5份供試品溶液，在相同色譜條件下進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，結(jié)果rsd為0.33%。
2.9 加樣回收率實(shí)驗(yàn)精密稱取6份已知含量的樣品粉末各0.25 g,加入等量的*對(duì)照品，按樣品含量測(cè)定項(xiàng)下的方法操作，記錄色譜圖，計(jì)算加樣回收率。結(jié)果見(jiàn)表1。其平均回收率為97.10%，rsd為0.63%（n=6）。表1回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果（略）
2.10 樣品含量測(cè)定取3批樣品各0.5 g，精密稱定，依法制成供試品溶液，均以20μl進(jìn)樣，分別測(cè)定吸收峰面積，以外標(biāo)法計(jì)算*含量。結(jié)果見(jiàn)表2。表2 樣品含量測(cè)定結(jié)果（略）
3 討論
曾選用不同溶劑系統(tǒng)作為流動(dòng)相進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，如：甲醇-水-冰醋酸（50∶50∶0.5）、乙腈-甲醇-水-冰醋酸（5∶45∶50∶0.5）、甲醇-水-冰醋酸（48∶52∶1）等［1］溶劑系統(tǒng)，結(jié)果甲醇-水-冰醋酸（48∶52∶1）分離效果。根據(jù)*的紫外吸收光譜特征，*在287nm處有zui大吸收，選擇287 nm作為檢測(cè)波長(zhǎng)。
本研究建立的復(fù)方*片中*含量的測(cè)定方法可為復(fù)方*片標(biāo)準(zhǔn)的進(jìn)一步完善提供依據(jù)。
【參考文獻(xiàn)】
［1］國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典,一部［s］.北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005：56.