我們在試驗(yàn)中使用pcr96孔板種細(xì)胞 會出現(xiàn)細(xì)胞分布不均勻的情況，甚至?xí)l(fā)現(xiàn)有些地方出現(xiàn)堆積性生長，不少地方細(xì)胞很稀疏，然而細(xì)胞密集的地方因細(xì)胞與細(xì)胞之間的接觸抑制影響細(xì)胞的生長，這樣就很難判斷干預(yù)因素對細(xì)胞的作用，因此將pcr96孔板種均勻也是進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)。
老方法：種過板子后，用手將96孔板平拿起，左右晃動幾下，然后再后晃動幾下，不過這種方法5個復(fù)孔中總有2-3個孔中細(xì)胞分布不均勻，多數(shù)情況下是孔的中間出現(xiàn)成堆分布，為此苦惱了陣子。還又次見師姐將種好的板子放在搖床上搖了幾分鐘，結(jié)果更慘了，細(xì)胞全部跑到中間了。
般96孔板我每孔是加100微升細(xì)胞懸液，從孔的左邊靠近底部加入，加完半邊板后，將未加的細(xì)胞懸液混下再，繼續(xù)加剩余的半邊板子，都加完后蓋上蓋子，左手輕輕扶住板的左邊，右手輕輕敲擊板的右邊緣，注意把握力度(我般輕巧敲三下)，太強(qiáng)或次數(shù)太多會導(dǎo)致細(xì)胞集中成堆，將板順時針旋轉(zhuǎn)(逆時針效果不好)，依次敲擊剩余三個邊，靜置約5分鐘，放入37度培養(yǎng) 箱。
新方法：這種方法簡直是太好了，種的很均勻。先用移液槍將吹打均勻的細(xì)胞吸起來，讓后將槍頭緊貼著孔的側(cè)壁(注意槍頭的尖不要接觸孔底)，然后將槍頭中的細(xì)胞緩緩的打下去，種好之后千萬不要搖晃板子，直接放到顯微鏡 下看就可以了，此方法可以說是100%的有效吧。 希望對大有幫助。
從6孔板到96空板要細(xì)胞分散均勻，先用培養(yǎng)基把細(xì)胞稀釋好，再把培養(yǎng)板放在適當(dāng)?shù)奈恢?，加入?xì)胞時和加入細(xì)胞后不移動培養(yǎng)板;如果空中有的地方?jīng)]有培養(yǎng)基可吹打，但不要移動培養(yǎng)板，加入細(xì)胞后靜置20-30分鐘再移入培養(yǎng)箱。這樣細(xì)胞般都能長的很均勻。當(dāng)然，提是細(xì)胞消化的很好。
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