免疫球蛋白g4是一種免疫球蛋白,其在人體的免疫反應(yīng)中起到重要作用。igg4的水平可以用來(lái)診斷和監(jiān)測(cè)多種疾病,例如自身免疫性疾病、過(guò)敏反應(yīng)和腫瘤等。為了檢測(cè)igg4的水平,科學(xué)家們開(kāi)發(fā)了免疫球蛋白g4elisa試劑盒。
免疫球蛋白g4elisa試劑盒含以下組件:涂層板、標(biāo)準(zhǔn)品、可溶解物、酶標(biāo)記抗體、緩沖液、底物和終止液。操作步驟如下:
準(zhǔn)備試板:取出所需數(shù)量的涂層板,將其加入微孔板支架中。每個(gè)微孔加入100μl的稀釋液,并在37℃孵育30分鐘。取出稀釋液后,在板孔中加入100μl的標(biāo)準(zhǔn)樣本或生物樣本,然后再次在37℃孵育2小時(shí)。
洗滌板孔:取出支架,倒掉樣本,加入清潔液并在每個(gè)孔內(nèi)洗滌3次。將板子翻轉(zhuǎn),輕輕拍干。
加入酶標(biāo)記抗體:將100μl的酶標(biāo)記抗體加入每個(gè)孔中,并在37℃孵育1小時(shí)。
洗滌板孔:取出支架,倒掉樣本,加入清潔液并在每個(gè)孔內(nèi)洗滌3次。將板子翻轉(zhuǎn),輕輕拍干。
加入底物:向每個(gè)孔中加入100μl的底物,然后在暗處孵育30分鐘。
加入終止液:向每個(gè)孔中加入50μl的終止液以停止反應(yīng)。使用elisa分析儀器測(cè)量各個(gè)孔內(nèi)的光密度值。
通過(guò)上述步驟,可以測(cè)量igg4的水平。試劑盒中的標(biāo)準(zhǔn)樣品可以用來(lái)制作標(biāo)準(zhǔn)曲線,比較不同孔中的光密度值,以確定每個(gè)樣本中igg4的濃度。