你知道細(xì)胞表面染色實驗操作流程是什么嗎？讓我們一起來看看吧！
一、細(xì)胞計數(shù)
將培養(yǎng)好的細(xì)胞收集于15ml離心管并計數(shù)；500g離心4min，去上清。
二、制備單細(xì)胞懸液
將收集的細(xì)胞用1ml 0.5%bsa/pbs溶液重懸，400g離心3min，去上清，重復(fù)2次；用0.5%bsa/pbs溶液重懸細(xì)胞至濃度1x106個細(xì)胞/ml，分配到96孔板中，每孔100μl細(xì)胞懸液。
三、阻斷fc受體
室溫孵育10-20min。
四、一抗孵育
每孔加入稀釋后的一抗溶液100μl，2-8℃反應(yīng)30min。
五、洗滌
400g離心5min，去上清后加入200μl 0.5%bsa/pbs溶液重懸，離心去上清，重復(fù)兩遍。
六、二抗孵育
對于非熒光染料直標(biāo)抗體，加入100μl熒光二抗重懸，避光2-8℃反應(yīng)30min。對于直標(biāo)抗體直接跳到步驟八。
七、洗滌
400g離心5min，去上清后加入200μl 0.5%bsa/pbs溶液重懸，離心去上清，重復(fù)兩遍。
八、重懸細(xì)胞
用200μl 0.5%bsa/pbs溶液重懸細(xì)胞，4℃保存，上機(jī)分析。
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