曾經(jīng)有學(xué)者做過統(tǒng)計(jì),世界范圍內(nèi)的細(xì)胞培養(yǎng),細(xì)胞發(fā)生支原體污染的概率在70%以上。
支原體因其體積小,在普通光學(xué)顯微鏡下難以觀察;在自然界中存在廣泛;污染前期癥狀不明顯且對(duì)抗生素有抵抗等特點(diǎn),往往令實(shí)驗(yàn)人員束手無策。
1、支原體污染對(duì)于細(xì)胞本身以及細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的影響是多方面的。比較直接的影響就是細(xì)胞狀態(tài)不佳,生長(zhǎng)速度慢,實(shí)驗(yàn)無法推進(jìn)。
2、細(xì)胞內(nèi)部的一些生理生化反應(yīng)也會(huì)因支原體污染而改變:細(xì)胞內(nèi)dna、rna及蛋白表達(dá)發(fā)生改變、細(xì)胞提前老化、加速細(xì)胞凋亡進(jìn)程等,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果,導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)不準(zhǔn)確,時(shí)間、經(jīng)費(fèi)的浪費(fèi)。
3、對(duì)于其他實(shí)驗(yàn)的影響:一株污染的細(xì)胞很有可能成為實(shí)驗(yàn)室的污染源,對(duì)工作區(qū)域以及培養(yǎng)箱和液氮罐造成污染,進(jìn)而污染其他細(xì)胞,導(dǎo)致其他細(xì)胞繼發(fā)性污染,實(shí)驗(yàn)受影響,數(shù)據(jù)無法重復(fù),預(yù)期結(jié)果出不來。
一般情況下,普通培養(yǎng)擴(kuò)增的細(xì)胞,如果發(fā)現(xiàn)支原體污染,建議直接將被污染的細(xì)胞都丟掉,并將實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)環(huán)境進(jìn)行消殺處理,防止支原體卷土重來。
對(duì)于已耗費(fèi)很多時(shí)間、大量擴(kuò)增起來的細(xì)胞,或經(jīng)過基因轉(zhuǎn)染、體外刺激等大量工作處理過的細(xì)胞,如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞被支原體污染了,又該怎么辦?
由于前期工作量巨大,實(shí)驗(yàn)人員往往不愿意丟棄已有細(xì)胞,還想做“最后的掙扎”,希望可以高效地清除細(xì)胞上的支原體污染,讓實(shí)驗(yàn)得以往下推進(jìn),以最終獲得準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。
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