elisa實(shí)驗(yàn)常用于檢測(cè)和定量復(fù)雜混合物中的特定蛋白質(zhì)。結(jié)果出來(lái)后，就需要一定的方法來(lái)評(píng)估數(shù)據(jù)是否可靠。主要從以下幾個(gè)方面進(jìn)行評(píng)估：檢測(cè)內(nèi)精度，稀釋線(xiàn)性度，回收率，靈敏度（檢測(cè)限）等。
檢測(cè)內(nèi)精度
檢測(cè)內(nèi)精度：一般是檢測(cè)孔板間的重復(fù)性。一般用變異系數(shù)cv值來(lái)評(píng)估，變異系數(shù)(cv)為標(biāo)準(zhǔn)差σ與平均數(shù)µ的比值。每個(gè)樣品的 %cv 通常應(yīng)小于 10%，%cv越大代表孔間差異大，重復(fù)性不好，結(jié)果不可信。
注：cv較大可由以下原因引起: 移液不準(zhǔn)確；在使用前確保槍頭在移液器上套牢，確保吸取正確的液體量；試劑濺入其他孔中；樣本或試劑受細(xì)菌或真菌污染；試劑間交叉污染；酶標(biāo)板各處溫度不一致，確保酶標(biāo)板在遠(yuǎn)離氣流的恒溫環(huán)境中孵育；部分孔干透，確保酶標(biāo)板在孵育過(guò)程中始終處于被封蓋狀態(tài)。
稀釋線(xiàn)性度
稀釋線(xiàn)性度：稀釋線(xiàn)性度是指不同稀釋水平下測(cè)試樣品的結(jié)果精度。不同稀釋倍數(shù)下的測(cè)量值與精確值的比值應(yīng)該在70%-130%之間。
在沒(méi)有基質(zhì)干擾時(shí)，無(wú)論如何稀釋?zhuān)瑴y(cè)量值都和真實(shí)值吻合。而有基質(zhì)干擾時(shí)，樣品稀釋會(huì)導(dǎo)致基質(zhì)被稀釋?zhuān)瑫?huì)造成非特異性結(jié)合比例的減少，測(cè)量值也會(huì)隨稀釋倍數(shù)的改變而改變。
回收率
回收率：回收率用于確定目標(biāo)物質(zhì)檢測(cè)是否受樣品基質(zhì)差異的影響。例如，待測(cè)上清液中所含的大量蛋白質(zhì)可能會(huì)阻礙抗體結(jié)合，提高信噪比，從而導(dǎo)致目標(biāo)物質(zhì)檢測(cè)的濃度低于實(shí)際值。通過(guò)將已知濃度的目標(biāo)物質(zhì)加入到不同的樣品基質(zhì)中來(lái)確定回收率。如果平均回收率為 80%-120%，則認(rèn)為樣品基質(zhì)對(duì)檢測(cè)準(zhǔn)確定量分析物的能力影響最小?；厥章?用基質(zhì)稀釋的目標(biāo)物質(zhì)的檢測(cè)值/用基質(zhì)稀釋的目標(biāo)物質(zhì)的確定值*100%。
回收率過(guò)高或是過(guò)低，則提示實(shí)驗(yàn)體系受到較大的復(fù)雜基質(zhì)干擾。比如在空白血清中摻入了 1000 pg/ml 的 il-2，回收率只有 50%，提示血清中有干擾因素影響了抗體與 il-2 分子的結(jié)合。
靈敏度（檢測(cè)限）
靈敏度（檢測(cè)限）：靈敏度指可與背景區(qū)分的低分析物水平，通常稱(chēng)為分析靈敏度或檢測(cè)限。一般有三個(gè)指標(biāo)，分別為lob，lod，loq。
lob(limit of blank), 就是我們通常講的空白檢測(cè)限。lob指的是用空白樣本去測(cè)試，在一定的概率下能測(cè)得的最高測(cè)量結(jié)果。
lod(limit of detection), 就是我們通常講的檢測(cè)限，就不是用空白樣本去檢測(cè)了，是對(duì)低濃度的分析物樣本進(jìn)行測(cè)試，在一定的概率的條件下能測(cè)得的低值。
loq(limit of quantitation), 就是我們通常講的定量限，這個(gè)也是用低濃度的分析物樣本進(jìn)行測(cè)試得出的較低的值，這個(gè)值的準(zhǔn)確性是有要求的，就是不光要能測(cè)到，而且還要保證結(jié)果是準(zhǔn)確的。
打個(gè)比方：比如遠(yuǎn)處一個(gè)物體，隨著距離的縮短，你的眼睛從看不見(jiàn)（空白檢測(cè)限）到能看見(jiàn)（檢測(cè)限），最后到能確認(rèn)是什么物體（定量限）。
信噪比
信噪比（signal/noise, s/n）就是信號(hào)與噪音的比值，也就是樣品數(shù)據(jù)與空白數(shù)據(jù)的比值。一般以信噪比為 3 : 1 時(shí)相應(yīng)濃度或量確定檢測(cè)限， 10：1時(shí)的量為定量限。
更多酶聯(lián)免疫試劑盒、緩沖液等生物試劑、試劑盒請(qǐng)進(jìn)入蘇州阿爾法生物進(jìn)行了解。