豬白介素1α(il-1α)elisa試劑盒用于定量分析人血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和體外細胞裂解液中il-1的α含量。預包被的抗體是il-1α單克隆抗體。檢測相抗體也是il-1α單克隆抗體,將樣品標記的抗體依次加入酶標板孔中進行反應(yīng),然后用pbs或tbs洗滌。然后加入過氧化物酶標記的親和素反應(yīng);用pbs或tbs*清洗后,用底物tmb顯色。tmb在過氧化物酶的催化下變成藍色,在酸的作用下變成最終的黃色。樣本中的顏色深度與人類il-1α正相關(guān)。
豬白介素1α(il-1α)elisa試劑盒原名淋巴細胞激活因子(laf),它激活t細胞和淋巴細胞產(chǎn)生和分泌il-2,主要由單核細胞和巨噬細胞產(chǎn)生,在炎癥和免疫反應(yīng)中起關(guān)鍵作用。interleukin-1α和interleukin-1β結(jié)合相同的細胞表面受體并引起相同的生物反應(yīng)。本試劑盒以人白介素-1α為標準,159個氨基酸,分子量為18kda。
豬白介素1α(il-1α)elisa試劑盒操作步驟:
1、室溫平衡20分鐘后,從鋁箔袋中取出所需的條帶,剩余的條帶用自封袋密封,放回4℃。
2、設(shè)置標準孔、樣品孔和空白孔,空白孔不加任何東西;在標準孔μl中加入不同濃度的標準50。
3、在待測樣品孔中加入10個樣品μ50。加入樣品稀釋液40μl。
4、然后將辣根過氧化物酶(hrp)標記的檢測抗體100加入標準孔和樣品孔(空白孔不加)μ50。用封板膜密封反應(yīng)孔,在37℃水浴或培養(yǎng)箱中孵育60min。
5、倒掉液體,在吸水紙上拍干,每個孔注滿洗液,靜置1min,扔掉洗液,在吸水紙上拍干,重復洗板5次(可以也可以用洗板機洗板)。
6、將50個底物a和b加入到所有μ50的孔中。在37℃避光孵育15分鐘。
7、在所有孔μ50中加入終止溶液50。在15min內(nèi)測量每個孔在450nm波長處的od值。
關(guān)鍵詞:培養(yǎng)箱 洗板機