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        培養(yǎng)基的常規(guī)配置方法

        發(fā)布時間:2024-05-28
        培養(yǎng)基是指供給微生物、植物或動物(或組織)生長繁殖的,由不同營養(yǎng)物質(zhì)組合配制而成的營養(yǎng)基質(zhì)。配置方法:
        1.配料:
        配方換算→在容器中加入少量水(蒸餾水,自然水)→按照配方稱取各種藥品(依次加入)→加足所需水量(一藥一勺,取藥后立即蓋上瓶蓋)。
        2.溶解:
        淀粉溶解:少量冷水調(diào)成糊狀。
        加熱溶解,特別是加有瓊脂的培養(yǎng)基,一定要煮沸,瓊脂的熔解溫度95-97℃ ,且需要邊加熱邊攪拌以防止燒焦。
        3.調(diào)ph:
        用1n的鹽酸或1n的 naoh把培養(yǎng)基調(diào)節(jié)到所要求的值。
        4.過濾:
        濾紙或棉花進行過濾。(有時可以省去)
        5.分裝:
        一般培養(yǎng)基放在三角瓶或試管中滅菌使用。
        (1)三角瓶
        若作靜置培養(yǎng),則100ml培養(yǎng)基/250ml的三角瓶,最多不能超過150ml培養(yǎng)基/250ml的三角瓶,否則滅菌時培養(yǎng)基沸騰容易污染棉塞,造成染菌;若作搖瓶培養(yǎng),則15-20ml培養(yǎng)基/250ml的三角瓶,保證通氣良好。
        (2)試管分裝
        液體培養(yǎng)基一般裝4-5ml,約試管的1/4高度;固體斜面培養(yǎng)基一般裝3-4ml,約試管的1/5高度。
        6.包扎:
        分裝好后,塞上棉塞,在用牛皮紙將棉塞包裹好,防止滅菌時水份進入把棉塞弄濕。
        7.滅菌:
        按配方上要求的溫度、壓力進行高壓蒸汽滅菌。如果滅菌的溫度太高,營養(yǎng)成分會被破壞,培養(yǎng)基中的糖、氨基酸會使培養(yǎng)基的顏色變深。
        8.擺斜面:
        滅菌后需要擺斜面的試管要趁熱斜著擺放,使其凝固成為一個斜面,約占試管長度的1/2。
        9.貯存:
        培養(yǎng)基在30℃下放置一天,無污染的即可使用。一般用牛皮紙包裹好存放于2-8℃冰箱中備用。
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