超微量分光光度計是一類很重要的分析儀器,無論在物理學、化學、生物學、醫(yī)學、材料學、環(huán)境科學等科學研究領域,還是在化工、醫(yī)藥、環(huán)境檢測、冶金等現(xiàn)代生產(chǎn)與管理部門,超微量分光光度計都有廣泛而重要的應用。超微量分光光度計就是利用分光光度法對物質(zhì)進行定量定性分析的儀器,常用于核酸,蛋白定量以及細菌生長濃度的定量。
超微量分光光度計目前成為現(xiàn)代分子生物實驗室常規(guī)儀器,廣泛應用于生命科學實驗室蛋白質(zhì)組學和基因組學等領域。應用液體的表面張力特性,檢測時經(jīng)上下臂的接觸拉出固定的光徑,達到快速、微量、高濃度檢測吸光度的特點。
超微量分光光度計常用于定量溶于緩沖液的寡核苷酸,單鏈、雙鏈dna,以及rna。核酸的zui高吸收峰的吸收波長260nm。每種核酸的分子構成不一,因此其換算系數(shù)不同。定量不同類型的核酸,事先要選擇對應的系數(shù)。如:1od的吸光值分別相當于50μg/ml的dsdna,37μg/ml的ssdna,40μg/ml的rna,30μg/ml的olig。測試后的吸光值經(jīng)過上述系數(shù)的換算,從而得出相應的樣品濃度。
超微量分光光度計與傳統(tǒng)分光光度計相比,優(yōu)點在于:
(1)所需樣品體積小,僅需1—2μl;
(2)不需要比色皿,用移液槍直接將樣品滴加到檢測平臺上,測量時樣品自動形成液柱,檢測完成后只需用干凈的吸水紙將樣品從檢測平臺上擦拭干凈即可,避免了因為比色皿清洗不凈帶來的交叉污染;
(3)一般具有多個光程,而傳統(tǒng)分光光度計的光程為10mm,超微量分光光度計樣品無需稀釋,測量范圍可達到常規(guī)分光光度計的50倍;
(4)氙氣閃光燈為燈源,代替了氘燈(紫外)和鎢燈(可見),使用壽命更長;
(5)不需要預熱,可隨時檢測,檢測時間短;
(6)顯示吸光度值的同時,程序直接給出濃度值(核酸、蛋白和熒光染料);
(7)占據(jù)實驗室空間體積比傳統(tǒng)分光光度計小很多。