你在進(jìn)行rna建庫(kù)時(shí)，是否遇到過這樣的困擾：
rna實(shí)驗(yàn)時(shí)，有些試劑打開一股臭味襲來，尤其是樣本很多時(shí)，這酸爽簡(jiǎn)直能把人帶走，讓人不得不懷疑這試劑是不是有毒性；
建庫(kù)試劑要求避光，總不能全程黑燈熄火操作吧？
這個(gè)毒性以及需要避光的罪魁禍?zhǔn)拙褪欠啪€菌素d。那么，建庫(kù)試劑盒中為什么要加放線菌素d呢？相關(guān)資料顯示，放線菌素d(actinomycin d)又稱更生霉素，分子中含有一個(gè)苯氧環(huán)結(jié)構(gòu)，通過它連接兩個(gè)等位的環(huán)狀肽鏈。此肽鏈可與dna分子的脫氧鳥嘌呤發(fā)揮特異性相互作用，使放線菌素d嵌入dna雙螺旋的小溝中，與dna形成復(fù)合體，阻礙rna多聚酶的功能，抑制rna的合成，特別是mrna的合成。通俗點(diǎn)來說就是，放線菌素d能抑制聚合酶在合成cdna一鏈的過程中同時(shí)合成cdna二鏈，這樣，在二鏈合成時(shí)才能使用dutp替換dttp。放線菌素d的添加對(duì)鏈特異建庫(kù)效果較好，能明顯增加建庫(kù)試劑盒的鏈特異性。加了放線菌素d的建庫(kù)試劑盒，能簡(jiǎn)便實(shí)驗(yàn)流程。鏈特異研究時(shí)，鏈特異性也大幅度提升，在rna相關(guān)的科研上，算是核心之一了。
進(jìn)口試劑商neb公司的rna建庫(kù)試劑盒，也做了對(duì)比，含放線菌素d和不含放線菌素d，鏈特異性上差別很大。
圖.n*公司對(duì)是否添加放線菌素d的對(duì)比實(shí)驗(yàn)結(jié)果
（圖片來自neb）
從圖中可以看到，90%以上的reads都比對(duì)到了預(yù)期的正義鏈上，說明含放線菌素d的測(cè)序文庫(kù)的鏈特異性良好。
但是，放線菌素d有它自身的弊端：有一定毒性，還需要避光。在目前這種預(yù)混版建庫(kù)試劑盒甚至是板式建庫(kù)試劑盒需求與日俱增的時(shí)代，需要避光限制了板式試劑盒的進(jìn)步。現(xiàn)在，再也不用擔(dān)心放線菌素的問題了。翌圣生物酶進(jìn)化平臺(tái)zymeeditor進(jìn)化了一款新型酶，該酶替換了放線菌素d的功能，且無臭無毒，還無需避光，并且鏈特異性上還更勝，再也不用擔(dān)心健康問題和避光問題了！翌圣生物，注重客戶體驗(yàn)，在rna建庫(kù)試劑盒的研究上，一直在不斷突破。
圖.翌圣rna建庫(kù)試劑盒進(jìn)化軸
什么？不含放線菌素d的試劑盒性能怎么樣？我們來上一波數(shù)據(jù)吧，用數(shù)據(jù)說話。
圖.含放線菌素d和不含放線菌素d的試劑盒使用同一樣本不同投入量的鏈特異性對(duì)比
使用舊版試劑盒（含放線菌素d）和新版試劑盒（不含放線菌素d）在分別投入10 ng、1 μg和4 μg進(jìn)行建庫(kù)時(shí)，文庫(kù)產(chǎn)量相當(dāng)。
圖.含放線菌素d和不含放線菌素d的試劑盒使用同一樣本不同投入量的鏈特異性對(duì)比
使用舊版試劑盒（含放線菌素d）和新版試劑盒（不含放線菌素d）在分別投入10 ng、1 μg和4 μg進(jìn)行建庫(kù)時(shí)，鏈特異性相當(dāng)。在低投入時(shí)，新版不含放線菌素d的試劑盒鏈特異性更高。
產(chǎn)品推薦產(chǎn)品名稱
貨號(hào)
規(guī)格
newhieff ngs ® evomax rna library prep kit（dutp）鏈特異性預(yù)混版total rna建庫(kù)試劑盒（不含放線菌素d）
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hieff ngs® ultima dual-mode rna library prep kit(premixed version)預(yù)混版total rna建庫(kù)試劑盒（含放線菌素d）
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