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        HILIC色譜柱的清洗溶劑選擇看過來!

        發(fā)布時間:2024-09-22
        一般而言,hilic色譜柱用淋洗液保存即可。若需要長時間保存,需要向柱內(nèi)泵入3%硼酸溶液,然后取下柱子,用無孔接頭將柱子兩端堵死,放在通風(fēng)干燥處保存。短時間不用,建議每周開機(jī)一次。當(dāng)色譜柱被玷污后,柱效會有所下降,保留時間縮小,分離度下降。清洗時,將色譜柱與抑制器分離,讓廢液直接排出流速不宜過快1ml/min即可,每次清洗后,應(yīng)該用去離子水沖洗10分鐘以上,再用淋洗液平衡系統(tǒng)。
        hilic色譜柱的清洗應(yīng)該用哪種溶劑呢?
        建議使用有機(jī)溶劑乙腈來清潔c18或者c8、硅基hplc色譜柱。thf是一種強(qiáng)倒相有機(jī)溶劑,很難從疏水性鍵合相上清除,從而導(dǎo)致色譜可變性,不宜使用。大多數(shù)情況下,乙腈這種強(qiáng)溶劑足以清除日常使用期間聚積在色譜柱上的樣品和流動相成分。
        然而用有機(jī)溶劑清潔色譜柱之前,一定要保證已經(jīng)清除流動相和色譜柱中可能殘留的緩沖鹽,這可以避免這些鹽在色譜柱中沉淀。
        為此事先應(yīng)確保流動相中沒有緩沖鹽,然后用這種混合物(15-20倍柱體積)沖洗色譜柱。也就是說,如果流動相是50%乙腈和50%50mm磷酸鹽緩沖液,那么首先應(yīng)該用50/50(v/v)乙腈和水的混合溶液來清除緩沖鹽。接著建議用30-40倍柱體積的純乙腈*沖洗色譜柱。如果認(rèn)為色譜柱頂部可能有微粒,應(yīng)該考慮從檢測器上拆下色譜柱并反轉(zhuǎn)流向,然后再開始清潔步驟。不要把色譜柱重新連接到檢測器上,可以把清潔溶劑收集到一個有傾口的燒杯中。
        *儲存色譜柱時一般都建議使用乙腈,按照上述步驟清潔之后,可方便地儲存色譜柱。準(zhǔn)備重新使用這個儲存的溶劑時,記住一定要用不含緩沖鹽的流動相沖洗色譜柱,然后再引入緩沖后的流動相,這能再次降低鹽沉淀的可能性。
        不*用洗滌劑來清潔反相(rp)hilic色譜柱。離子洗滌劑通常是一端帶一個離子化基團(tuán)的長鏈碳化合物,一般用作離子配對試劑。因為這些長碳鏈能與反相色譜柱的鍵合相很牢固地結(jié)合起來(如c18反相色譜柱的鍵合相能牢固地保留洗滌劑的長碳鏈),因此很難清除。
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