鏈球菌呈球形或橢圓形,直徑0.6-1.0μm,呈鏈狀排列,長短不一,從4-8個至20-30個菌細胞組成不等,鏈的長短與細菌的種類及生長環(huán)境有關。在液體培養(yǎng)基中易呈長鏈,固體培養(yǎng)基中常呈短鏈,由于鏈球菌能產生脫鏈酶,所以正常情況下鏈球菌的鏈不能無限制的延長。多數(shù)菌株在血清肉湯中培養(yǎng)2-4h易形成透明質酸的莢膜,繼續(xù)培養(yǎng)后消失。該菌不形成芽胞,無鞭毛,易被普通的堿性染料著色,革蘭氏陽性,老齡培養(yǎng)或被中性粒細胞吞噬后,轉為革蘭氏陰性。
1、樣品處理:取25g固體(或25ml液體)檢樣加入225ml滅菌生理鹽水,制成混懸液。
2、吸取5ml混懸液接種至50ml葡萄糖肉浸液肉湯,或直接劃線于血平板(如檢樣污染嚴重,可同時接種5ml至匹克氏肉湯),36℃生化培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h,接種血平板,36℃生化培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h,挑起乙型溶血圓形突起的細小菌落,在血平板上分純,觀察在液體和固體中的培養(yǎng)特征、溶血情況及革蘭氏染色、形態(tài),并進行鏈激酶試驗和桿菌肽敏感試驗。
3、鏈激酶試驗:吸取草酸鉀血漿0.2ml,加0.8ml滅菌生理鹽水,混勻,再加入鏈球菌18-24h36℃肉浸液肉湯培養(yǎng)物0.5ml及0.25%氯化鈣0.25ml,混勻,置于36℃水浴鍋中水浴10min,血漿混合物自行凝固,觀察凝塊重新*溶解的時間,*溶解為陽性,如24h后不溶解即為陰性。同時用肉浸液肉湯做陰性對照,用已知的鏈激酶陽性的菌株做陽性對照。
4、桿菌肽敏感試驗:取典型菌落的菌液涂布于血平板上,用滅菌鑷子夾取每片含有0.04單位的桿菌肽紙片置于上述平板上,36℃培養(yǎng)18-24h,如有抑菌圈出現(xiàn)即為陽性。用已知的陽性菌株做對照。