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乳酸脫氫酶（lactate dehydrogenase，ldh）活性檢測(cè)試劑盒商品貨號(hào)：ms1001
英文名稱：micro lacate dehydrogenase（ldh）assay kit
別名：乳酸脫氫酶試劑盒 ldh kit 乳酸脫氫酶（ldh）試劑盒 乳酸脫氫酶（ldh）測(cè)試盒
檢測(cè)方法：微量法
商品貨號(hào)：商品品牌：規(guī)格基本售價(jià)選擇規(guī)格
ms1001-100管/48樣 索橋生物 100管/48樣 ￥330.00元
產(chǎn)品詳細(xì)介紹產(chǎn)品說明書
測(cè)定意義：
ldh（ec 1.1.1.27）廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，是糖酵解途徑的末端酶，催化丙酮酸與乳酸之間的可逆反應(yīng)，伴隨著nad+/nadh之間互變。
測(cè)定原理：
ldh催化nad+氧化乳酸生成丙酮酸，丙酮酸進(jìn)一步與2, 4 - 二硝基苯肼作用生成丙酮酸二硝基苯腙，在堿性溶液中顯棕紅色，顏色深淺與丙酮酸濃度成正比。
貨號(hào)：ms1001 規(guī)格：100管/48樣
乳酸脫氫酶（lactate dehydrogenase，ldh）試劑盒說明書
微量法
正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
測(cè)定意義：
ldh（ec 1.1.1.27）廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，是糖酵解途徑的末端酶，催化丙酮酸與乳酸之間的可逆反應(yīng)，伴隨著nad+/nadh之間互變。
測(cè)定原理：
ldh催化nad+氧化乳酸生成丙酮酸，丙酮酸進(jìn)一步與2, 4 - 二硝基苯肼作用生成丙酮酸二硝基苯腙，在堿性溶液中顯棕紅色，顏色深淺與丙酮酸濃度成正比。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器：
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、恒溫水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制：
提取液：60ml×1瓶， 4℃保存；
試劑一：液體5ml×1瓶， 4℃保存；
試劑二：粉劑×1支，-20℃保存，用時(shí)加入1.3 ml蒸餾水充分溶解備用，用不完的試劑
分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融；
試劑三：液體5 ml×1瓶，4℃避光保存；
試劑四：液體20ml×1瓶，4℃保存；
樣品測(cè)定的準(zhǔn)備：
1、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備：
細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：提取液體積（ml）為1000~5000：1的比例（建議2000萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml提取液），超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率20％或200w，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。
組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。
2、血清（漿）樣品：直接檢測(cè)。
測(cè)定步驟：
分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至450nm，蒸餾水調(diào)零。2、樣本測(cè)定（在ep管中加入下列試劑）
試劑名稱(μl)
測(cè)定管
對(duì)照管
樣本
10
10
試劑一
50
50
試劑二
10
蒸餾水
10
充分混勻，37℃（哺乳動(dòng)物）或25℃（其它物種）準(zhǔn)確水浴15min
試劑三
50
50
充分混勻，37℃（哺乳動(dòng)物）或25℃（其它物種）準(zhǔn)確水浴15min
試劑四
150
150
充分混勻，室溫靜置15min， 450 nm下測(cè)定吸光度，計(jì)算δa=a測(cè)定管-a對(duì)照管。每個(gè)測(cè)定管需要設(shè)一個(gè)對(duì)照管。
ldh活力單位的計(jì)算：
a.用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下
1、標(biāo)準(zhǔn)條件下測(cè)定的回歸曲線， y = 0.725x (x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度，μmol/ml；y為對(duì)吸光度)。
2、血清（漿）ldh活力的計(jì)算
單位的定義：每ml血清（漿）每分鐘催化產(chǎn)生1nmol丙酮酸定義為一個(gè)酶活力單位。
ldh（nmol/min/ml）=δa÷0.725÷t×103=92×δa
3、細(xì)胞、細(xì)菌和組織中l(wèi)dh活力的計(jì)算
（1）按樣本蛋白濃度計(jì)算：
單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1 nmol丙酮酸定義為一個(gè)酶活力單位。
ldh（nmol/min/mg prot）=[δa÷0.725×v1]÷(v1×cpr)÷t×103 =92×δa÷cpr
需要另外測(cè)定，建議使用本公司bca蛋白質(zhì)含量測(cè)定試劑盒。
（2） 按樣本鮮重計(jì)算：
單位的定義：每g組織每分鐘催化產(chǎn)生1nmol丙酮酸定義為一個(gè)酶活力單位。
ldh（nmol/min/g鮮重）=[δa÷0.725×v1]÷(w×v1÷v2)÷t×103 =92×δa÷w
（3）按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算：
單位的定義：每1萬個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘催化產(chǎn)生1nmol丙酮酸定義為一個(gè)酶活力單位。
ldh（nmol/min/104 cell）= [δa÷0.725×v1]÷(2000×v1÷v2)÷t×103 =0.046×δa
v1：加入反應(yīng)體系中樣本體積，0.01ml；v2：加入提取液體積，1 ml；t：反應(yīng)時(shí)間，15 min；cpr：蛋白質(zhì)濃度，mg/ml；w：樣本質(zhì)量，g；2000：細(xì)胞或細(xì)菌總數(shù)，2000萬；103：1umol/ml=103 nmol/ml。
b.使用96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下：
1、標(biāo)準(zhǔn)條件下測(cè)定的回歸曲線， y = 0.3625x (x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度，μmol/ml；y為對(duì)吸光度)。
2、血清（漿）ldh活力的計(jì)算
單位的定義：每ml血清（漿）每分鐘催化產(chǎn)生1nmol丙酮酸定義為一個(gè)酶活力單位。
ldh（nmol/min/ml）=δa÷0.3625÷t×103=184×δa
3、細(xì)胞、細(xì)菌和組織中l(wèi)dh活力的計(jì)算
（1）按樣本蛋白濃度計(jì)算：
單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1 nmol丙酮酸定義為一個(gè)酶活力單位。
ldh（nmol/min/mg prot）=[δa÷0.3625×v1]÷(v1×cpr)÷t×103 =184×δa÷cpr
需要另外測(cè)定，建議使用本公司bca蛋白質(zhì)含量測(cè)定試劑盒。
（2） 按樣本鮮重計(jì)算：
單位的定義：每g組織每分鐘催化產(chǎn)生1nmol丙酮酸定義為一個(gè)酶活力單位。
ldh（nmol/min/g鮮重）=[δa÷0.3625×v1]÷(w×v1÷v2)÷t×103 =184×δa÷w
（3）按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算：
單位的定義：每1萬個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘催化產(chǎn)生1nmol丙酮酸定義為一個(gè)酶活力單位。
ldh（nmol/min/104 cell）= [δa÷0.3625×v1]÷(2000×v1÷v2)÷t×103 =0.092×δa
v1：加入反應(yīng)體系中樣本體積，0.01ml；v2：加入提取液體積，1 ml；t：反應(yīng)時(shí)間，15 min；cpr：蛋白質(zhì)濃度，mg/ml；w：樣本質(zhì)量，g；2000：細(xì)胞或細(xì)菌總數(shù)，2000萬；103：1umol/ml=103 nmol/ml。
輔酶ⅰ系列
qs1000 輔酶ⅰnad(h)含量測(cè)試盒 可見分光光度法 50管/24樣 500
ms1000 輔酶ⅰnad(h)含量測(cè)試盒 微量法 100管/48樣 920
qs1001 乳酸脫氫酶（ldh）測(cè)試盒 可見分光光度法 50管/24樣 170
ms1001 乳酸脫氫酶（ldh）測(cè)試盒 微量法 100管/48樣 330
qs1002 nad-蘋果酸脫氫酶（nad-mdh）測(cè)試盒 紫外分光光度法 50管/48樣 280
ms1002 nad-蘋果酸脫氫酶（nad-mdh）測(cè)試盒 微量法 100管/96樣 550
qs1003 nadp-蘋果酸脫氫酶（nadp-mdh）測(cè)試盒 紫外分光光度法 50管/48樣 320
ms1003 nadp-蘋果酸脫氫酶（nadp-mdh）測(cè)試盒 微量法 100管/96樣 600
qs1004 nadh氧化酶（nox）測(cè)試盒 可見分光光度法 50管/48樣 450
ms1004 nadh氧化酶（nox）測(cè)試盒 微量法 100管/96樣 850
qs1005-50 檸檬酸合酶(cs）測(cè)試盒 可見分光光度法 50管/48樣 3200
qs1005-25 檸檬酸合酶(cs）測(cè)試盒 可見分光光度法 25管/24樣 2000
ms1005 檸檬酸合酶(cs）測(cè)試盒 微量法 100管/48樣 3500
qs1006 丙酮酸脫羧酶（pdc）測(cè)試盒 紫外分光光度法 50管/48樣 720
ms1006 丙酮酸脫羧酶（pdc）測(cè)試盒 微量法 100管/96樣 1400
qs1007 醇脫氫酶（adh）測(cè)試盒 紫外分光光度法 50管/48樣 280
ms1007 醇脫氫酶（adh）測(cè)試盒 微量法 100管/96樣 550
qs1008 單脫氫抗壞血酸還原酶（mdhar）測(cè)試盒 紫外分光光度法 50管/48樣 800
ms1008 單脫氫抗壞血酸還原酶（mdhar）測(cè)試盒 微量法 100管/96樣 1550
qs1009 乙醛脫氫酶（aldh）測(cè)試盒 紫外分光光度法 50管/48樣 420
ms1009 乙醛脫氫酶（aldh）測(cè)試盒 微量法 100管/96樣 800
qs1010 nad激酶（nadk）測(cè)試盒 可見分光光度法 50管/48樣 600
ms1010 nad激酶（nadk）測(cè)試盒 微量法 100管/48樣 1100
qs1011 線粒體呼吸鏈復(fù)合體ⅰ/nadh-輔酶q還原酶測(cè)試盒 紫外分光光度法 25管/24樣 1280
ms1011 線粒體呼吸鏈復(fù)合體ⅰ/nadh-輔酶q還原酶測(cè)試盒 微量法 100管/96樣 2500