小鼠p物質(zhì)elisa試劑盒試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(elisa)。往預(yù)先包被抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、hrp標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物tmb顯色,tmb在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(od 值),計(jì)算樣品濃度。
小鼠p物質(zhì)elisa試劑盒檢測(cè)操作步驟:
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μl;
3. 樣本孔先加待測(cè)樣本10μl,再加樣本稀釋液40μl;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(hrp)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μl,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6. 每孔加入底物a、b各50μl,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μl,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的od值。
8. 準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)r值,大于等于0.9900。
9. 靈敏度:*檢測(cè)濃度小于1.0 ng/ml。
10. 特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
11. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。
12. 貯藏:2-8℃,避光防潮保存。
13. 有效期:6個(gè)月
關(guān)鍵詞：酶標(biāo)儀 水浴鍋 恒溫箱 洗板機(jī)