微量加樣器
微量加樣器(移液器)出現(xiàn)于1956年,由德國生理化學(xué)研究所的科學(xué)家schnitger發(fā)明,其后
,在1958年德國公司開始生產(chǎn)按鈕式微量加樣器,成為一家生產(chǎn)微量加樣器的公司。這
些微量加樣器的吸液范圍在1—1000μl之間,適用于臨床常規(guī)化學(xué)實(shí)驗(yàn)室使用。微量加樣器發(fā)展
的不但加樣更為精確,而且品種也多種多樣,如微量分配器、多通道微量加樣器等,其加樣的物
理學(xué)原理有下面兩種:
①使用空氣墊(又稱活塞沖程)加樣;
②使用無空氣墊的活塞正移動(positivedisplacement)加樣。上述兩種不同原理的微量加樣器有
其不同的特定應(yīng)用范圍。
空氣墊加樣器
移液器
移液器
活塞沖程(空氣墊)加樣器可很方便地用于固定或可調(diào)體積液體的加樣,加樣體積的范圍在小于1ul
至l0ml之間。加樣器中的空氣墊的作用是將吸于塑料吸頭內(nèi)的液體樣本與加樣器內(nèi)的活塞分隔開
來,空氣墊通過加樣器活塞的彈簧樣運(yùn)動而移動,進(jìn)而帶動吸頭中的液體,使體積和移液吸頭中
高度的增加決定了加樣中這種空氣墊的膨脹程度。因此,活塞移動的體積必須比所希望吸取的體
積要大約2%~4%,溫度、氣壓和空氣濕度的影響必須通過對空氣墊加樣器進(jìn)行結(jié)構(gòu)上的改良而降
低,使得在正常情況下不至于影響加樣的準(zhǔn)確度。一次性吸頭是本加樣系統(tǒng)的一個重要組成部分
,其形狀、材料特性及與加樣器的吻合程度均對加樣的準(zhǔn)確度有很大的影響。
活塞正移動
以活塞正移動為原理的加樣器和分配器與空氣墊加樣器所受物理因素的影響不同,因此,在空氣
墊加樣器難以應(yīng)用的情況下,活塞正移動加樣器可以應(yīng)用,如具有高蒸汽壓的、高黏稠度以及密
度大于2.0g/cm3的液體;又如在臨床聚合酶鏈反應(yīng)(pcr)測定中,為防止氣溶膠的產(chǎn)生,使
用活塞正移動加樣器?;钊苿蛹訕悠鞯奈^與空氣墊加樣器吸頭有所不同,其內(nèi)含一個可與
加樣器的活塞耦合的活塞,這種吸頭一般由生產(chǎn)活塞正移動加樣器的廠家配套生產(chǎn),不能使用通
常的吸頭或不同廠家的吸頭。
多通道加樣器
多通道加樣器的原理與上述相同。多通道加樣器通常為8通道或12通道,與8x12=96孔微孔板一致
。多通道加樣器的使用不但可減少實(shí)驗(yàn)操作人員的加樣操作次數(shù),而且可提高加樣的精密度。
電子和分配器
多道可調(diào)移液器
多道可調(diào)移液器
電子加樣器和分配器的原理與上述相同。電子加樣器和分配器為半自動加樣系統(tǒng),電子加樣器最
大的優(yōu)點(diǎn)是其具有很高的加樣重復(fù)性,應(yīng)用范圍廣。
使用步驟編輯
移液器在進(jìn)行分析測試方面的研究時,一般采用移液器(pipette)量取少量或微量的液體。對于
移液器的正確使用方法及其一些細(xì)節(jié)操作,是很多人都會忽略的,分幾個方面詳細(xì)敘述。
量程的調(diào)節(jié)
在調(diào)節(jié)量程時,如果要從大體積調(diào)為小體積,則按照正常的調(diào)節(jié)方法,順時針旋轉(zhuǎn)旋鈕即可;但
如果要從小體積調(diào)為大體積時,則可先逆時針旋轉(zhuǎn)刻度旋鈕至超過量程的刻度,再回調(diào)至設(shè)定體
積,這樣可以保證量取的精確度。
在該過程中,千萬不要將按鈕旋出量程,否則會卡住內(nèi)部機(jī)械裝置而損壞了移液器。
槍頭的裝配
在將槍頭(pipette tips)套上移液器時,很多人會使勁地在槍頭盒子上敲幾下,這是錯誤的做
法,因?yàn)檫@樣會導(dǎo)致移液器的內(nèi)部配件(如彈簧)因敲擊產(chǎn)生的瞬時撞擊力而變得松散,甚至?xí)?br>導(dǎo)致刻度調(diào)節(jié)旋鈕卡住。正確的方法是將移液器(器)垂直插入槍頭中,稍微用力左右微微轉(zhuǎn)動
即可使其緊密結(jié)合。如果是多道(如8道或12道)移液器,則可以將移液器的道對準(zhǔn)個槍
頭,然后傾斜地插入,往前后方向搖動即可卡緊。槍頭卡緊的標(biāo)志是略為超過o型環(huán),并可以看到
連接部分形成清晰的密封圈。
移液的方法
移液之前,要保證移液器、槍頭和液體處于相同溫度。吸取液體時,移液器保持豎直狀態(tài),將槍
頭插入液面下2-3毫米。在吸液之前,可以先吸放幾次液體以潤濕吸液嘴(尤其是要吸取粘稠或
密度與水不同的液體時)。這時可以采取兩種移液方法。
一是前進(jìn)移液法。用大拇指將按鈕按下至停點(diǎn),然后慢慢松開按鈕回原點(diǎn)(吸取固定體積的
液體)。接著將按鈕按至停點(diǎn)排出液體,稍停片刻繼續(xù)按按鈕至第二停點(diǎn)吹出殘余的液體。
最后松開按鈕。
二是反向移液法。此法一般用于轉(zhuǎn)移高粘液體、生物活性液體、易起泡液體或極微量的液體,其
原理就是先吸入多于設(shè)置量程的液體,轉(zhuǎn)移液體的時候不用吹出殘余的液體。先按下按鈕至第二
停點(diǎn),慢慢松開按鈕至原點(diǎn),吸上之后,斜靠一下容器壁將多余液體沿器壁流回容器。接著將按
鈕按至停點(diǎn)排出設(shè)置好量程的液體,繼續(xù)保持按住按鈕位于停點(diǎn)(千萬別再往下按),
取下有殘留液體的槍頭,棄之吸上之后,斜靠一下容器壁將多余液體沿器壁流回容器 [1] 。
移液器放置
使用完畢,可以將其豎直掛在移液器架上,但要小心別掉下來。當(dāng)移液器槍頭里有液體時,切勿
將移液器水平放置或倒置,以免液體倒流腐蝕活塞彈簧。
關(guān)鍵詞:移液器