科學(xué)家通過土壤廣泛篩選,分離獲得一株催化連續(xù)羥醛縮合制備ctehp的短乳桿菌(lactobacillusbrevis),進(jìn)而通過分子克隆,獲得其中編碼醛縮酶lbdera的基因序列,并在大腸桿菌中可溶性表達(dá)。與其它醛縮酶相比,lbdera具有較高的活性和熱穩(wěn)定性,并且對底物醛具有很高的耐受性。采用x-ray衍射的方法解析了該酶的晶體結(jié)構(gòu),在此基礎(chǔ)上通過半理性分子改造的方法,得到了穩(wěn)定性進(jìn)一步提高的突變體lbderae78k。利用lbderae78k作為催化劑合成他汀前體ctehp,產(chǎn)物濃度達(dá)到0.6mol/l,時(shí)空產(chǎn)量高達(dá)792.5gl-1d-1。研究成果為醛縮合成他汀側(cè)鏈的工藝路線提供了重要的新酶資源。
原文檢索:efficientsynthesisofastatinprecursorinhighspace-timeyieldbyanewaldehyde-tolerantaldolaseidentifiedfromlactobacillusbrevis