紅掌，是天南星科花燭屬多年生常綠植物，葉革質(zhì)光亮，單花頂生，花期長達(dá)1個(gè)半月左右。利用常規(guī)播種、分株法繁殖切花紅掌，繁殖率極低，播種繁殖所需時(shí)間長，且易產(chǎn)生變異。利用組織培養(yǎng)快速繁殖切花紅掌，可滿足市場(chǎng)的大量需求。
材料與方法
材料來源為河南濮陽世錦公司自行選育的優(yōu)質(zhì)紅掌切花品種。
外植體滅菌處理取切花紅掌的幼嫩葉片及葉柄作為供試材料，首先在流水下沖洗1小時(shí)，同時(shí)用毛刷輕輕刷洗，在消毒前先將葉片切成1.5cm×1.5cm左右的小片，將葉柄切成1.5cm左右長的小段，將其放入滅過菌的廣口瓶中，用75%酒精浸泡30秒后，再用0.1%hgcl2浸泡消毒8分鐘，用無菌水沖洗5次，在無菌紙上把葉片切成1cm×1cm左右的小片，葉柄切成1cm左右的小段，接種在滅過菌的培養(yǎng)基上，所有無菌操作必須在超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行。
培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件基本培養(yǎng)基為ms加蔗糖30g/l、瓊脂6g/l，ph值5.8。在不同培養(yǎng)階段添加不同種類和濃度的植物生長調(diào)節(jié)劑，培養(yǎng)溫度為25℃±1℃，光照強(qiáng)度2000～3000lux，每日光照14小時(shí)。
結(jié)果與分析
不同外植體脫分化程度比較將2種不同外植體分別接種于ms+6-ba1.5+naa0.7的同一培養(yǎng)基上，培養(yǎng)3周后，葉片外植體首先明顯膨大，長出愈傷組織塊，5周后，葉片外植體都長出了愈傷組織塊。觀察發(fā)現(xiàn)2種不同外植體都能被誘導(dǎo)出愈傷組織，只是葉片較容易被脫分化。
6-ba對(duì)愈傷組織誘導(dǎo)的影響將消過毒的葉片接種于加有不同濃度6-ba的ms+6-ba+naa0.7的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，觀察不同濃度6-ba對(duì)葉片外植體愈傷組織誘導(dǎo)的影響。由表2可看出，不同濃度的6-ba對(duì)切花紅掌葉片的誘導(dǎo)有明顯不同。在無6-ba的培養(yǎng)基上，不能誘導(dǎo)出愈傷組織。當(dāng)6-ba濃度低于1.5mg/l時(shí)，隨著6-ba濃度的增大，愈傷組織誘導(dǎo)率及增殖率都隨之增大；而較高濃度的6-ba又抑制了愈傷組織的誘導(dǎo)及增殖。當(dāng)6-ba為1.5mg/l時(shí)，愈傷組織誘導(dǎo)率及增殖率都達(dá)到最大，效果最好。因此ms+6-ba1.5+naa0.7對(duì)切花紅掌是較理想的誘導(dǎo)培養(yǎng)基。6-ba對(duì)愈傷組織分化增殖的影響將誘導(dǎo)成功的愈傷組織塊分別轉(zhuǎn)接到含不同濃度6-ba的分化培養(yǎng)基上進(jìn)行分化培養(yǎng)，觀察不同濃度外源激素6-ba對(duì)愈傷組織分化產(chǎn)芽的影響。
由表3可見，不同濃度的6-ba對(duì)切花紅掌愈傷組織的分化具有明顯不同的效應(yīng)。隨著低濃度6-ba濃度的增大，芽的分化率及產(chǎn)芽量都隨之增大。當(dāng)6-ba達(dá)1.0mg/l以上時(shí)，明顯抑制了芽的分化，加速了愈傷組織的生長；當(dāng)6-ba為0.5mg/l時(shí)，芽分化率達(dá)最高為91.43%，芽的生長速度也最快。將布滿叢芽的愈傷組織切成小塊，進(jìn)行繼代培養(yǎng)，每30天繼代一次，可達(dá)到工廠化生產(chǎn)的目的。
生根培養(yǎng)從叢芽中切取2～3cm長的單芽接種于生根培養(yǎng)基中，經(jīng)過15天的培養(yǎng)，觀察其在不同培養(yǎng)基中的生長情況。
由表4可看出，naa和iba0.2mg/l對(duì)切花紅掌生根都有很好的促進(jìn)作用。前者根的形態(tài)為粗短，后者為細(xì)長，但naa價(jià)格較iba低，所以1/2ms+naa0.2mg/l作為切花紅掌的生根培養(yǎng)基的首選。
試管苗移栽取生根良好的試管苗，用水把苗基部的培養(yǎng)基清洗干凈，栽入草炭與珍珠巖1∶1的基質(zhì)中，澆透水，放到遮蔭的溫棚內(nèi)，溫度保持在18℃～25℃之間，保持周圍濕度90%左右，經(jīng)過精心管理，2周后，試管苗移栽成活率一般可達(dá)90%。經(jīng)過多次移栽試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，保持小苗周圍空氣濕潤，通氣良好且保濕良好的栽培基質(zhì)以及適宜的溫度是切花紅掌試管苗移栽成功的關(guān)鍵。
討論
在切花紅掌的組織培養(yǎng)過程中，首先誘導(dǎo)產(chǎn)生優(yōu)質(zhì)愈傷組織，分化出芽點(diǎn)多的優(yōu)良無性系作為快繁材料，這樣就能在短時(shí)間內(nèi)生產(chǎn)大量優(yōu)質(zhì)種苗。
從培養(yǎng)基移栽入土，是從異養(yǎng)到自養(yǎng)的轉(zhuǎn)變。試管異養(yǎng)條件是在無菌、高濕、低光照、溫度穩(wěn)定的環(huán)境中生長，而溫室是相對(duì)干燥、強(qiáng)光、溫差大的環(huán)境，因此，在試管苗移栽馴化期，要根據(jù)切花紅掌的生理特點(diǎn)及試管苗特點(diǎn)選擇透氣、保溫好、適合切花紅掌生長的移栽基質(zhì)，要保證適宜的溫度和濕度，創(chuàng)造良好的生長環(huán)境，減少病蟲害，提高移栽成活率。
眾所周知，高濃度的細(xì)胞分裂素會(huì)造成植株的不可預(yù)知變異，在上述組培快繁技術(shù)中所用分裂素濃度雖未引起明顯變異，但濃度大小一定要合適。